JoVE Encyklopedia Eksperymentów
Neuronauka
0 wyświetleń • 4:06 min. • July 8th, 2025
Zacznij od komórek nerwowych hodowanych w pożywce różnicowania komórek.
Dodaj złote nanopręty do podłoża.
Inkubuj, aby komórka mogła pochłonąć nanopręt w procesie zwanym endocytozą.
Stymuluj nanopręty za pomocą lasera.
Wiązka laserowa wzbudza elektrony powierzchniowe na nanopręcie. Wzbudzone elektrony wracają następnie do stanu podstawowego, uwalniając energię cieplną.
Ciepło to stymuluje komórki nerwowe do wytwarzania wypustek wspieranych przez specyficzne białko cytoszkieletu zwane βIII-tubuliną.
Usuń zużyte medium.
Napraw komórki. Dodaj odpowiedni detergent, aby przepuszczalność membrany.
Dodaj środek blokujący, aby zapobiec niespecyficznemu wiązaniu przeciwciał.
Oznacz komórki pierwszorzędowymi przeciwciałami, które są skierowane przeciwko βIII-tubulinie.
Dodaj znakowane fluorescencyjnie przeciwciała drugorzędowe, które oddziałują z przeciwciałami pierwszorzędowymi.
Zabarwić jądro niebieskim barwnikiem fluorescencyjnym.
Za pomocą mikroskopii epifluorescencyjnej obserwuj czerwone komórki z niebieskimi jądrami.
Wydłużone wypustki komórki wskazują na różnicowanie komórek nerwowych.
Hoduj komórki neuronalne NG108-15 w 10 mililitrach pożywki do hodowli komórkowej w kolbie T75, a nas
Wyświetl pełny transkrypt i uzyskaj dostęp do tysięcy filmów naukowych