JoVE Encyklopedia Eksperymentów
Neuronauka
0 wyświetleń • 3:59 min. • July 8th, 2025
Zacznij od odizolowanego mózgu. Szybko zanurz mózg we wstępnie schłodzonym sztucznym płynie mózgowo-rdzeniowym lub aCSF, aby wstrzymać procesy metaboliczne.
aCSF zawiera NMDG, duży kation organiczny, który zmniejsza uszkodzenia i śmierć komórek nerwowych.
aCSF zawiera również HEPES, który utrzymuje pH i stężenie soli oraz zapobiega obrzękom i uszkodzeniom komórek.
Przenieś mózg na szalkę Petriego zawierającą bibułę filtracyjną.
Przytnij mózg, aby uzyskać pożądany obszar.
Zamocuj blok mózgu w uchwycie na próbkę za pomocą odpowiedniego kleju i zanurz go w agarozie.
Umieść uchwyt próbki w krajalnicy.
Napełnij zbiornik krajalnicy wstępnie schłodzonym aCSF i napowietrzaj roztwór, aby zapewnić optymalny dopływ tlenu.
Uzyskaj skrawki bloku mózgowego.
Przenieś skrawki do wstępnie podgrzanego płynu mózgowo-rdzeniowego, aby wznowić procesy metaboliczne, umożliwiając skrawkom regenerację.
Delikatnie zgarnij nienaruszony mózg do zlewki z wstępnie schłodzonym NMDG-HEPES aCSF i pozwól mózgowi równomiernie ostygnąć przez około 1 minutę. Teraz użyj dużej szpatułki, aby przenieść mózg ze zlewki na szalkę Petriego, pokrytą bibułą filtracyjną.
Przytnij i zamontuj mózg zgodnie z preferowanym kątem kro
Wyświetl pełny transkrypt i uzyskaj dostęp do tysięcy filmów naukowych