JoVE Encyklopedia Eksperymentów
Neuronauka
0 wyświetleń • 5:42 min. • July 8th, 2025
Weź mikropłytkę z przylegającą kulturą komórek glejowych pochodzących z mózgu szczura. Kultura zawiera astrocyty, mikroglej i oligodendrocyty.
Usuń pożywkę, inkubuj z roztworem enzymu, aby odłączyć komórki, a następnie przenieś je do probówki.
Odwirować i usunąć supernatant z resztkami komórkowymi. Ponownie zawieś komórki w ciepłym podłożu.
Rozcierać za pomocą strzykawki w celu rozbicia grudek komórek i przefiltrować za pomocą sitka w celu uzyskania zawiesiny jednokomórkowej.
Dodaj fotosieciowalny biopolimer, środki sieciujące i składniki macierzy zewnątrzkomórkowej.
Wlej masę do formy przymocowanej do szkiełka nakrywkowego. Wystaw mieszaninę na działanie światła o dużym natężeniu, aby wywołać sieciowanie, tworząc żel i otaczając komórki glejowe.
Wyjmij formę i umieść szkiełka nakrywkowe w mikropłytce. Dodaj ciepłe podłoże i inkubuj żel w warunkach fizjologicznych.
Komórki namnażają się w nośnej macierzy zewnątrzkomórkowej i tworzą sieć komórkową, tworząc trójwymiarową kulturę komórek glejowych.
24 godziny przed enkapsulacją komórek odessać pożywkę z dwutygodniowych kultur pierwotnych i dodać 1 mililitr świeżej pożywki do każdej studzienki. W dniu enkapsulacji komórek przygotuj 12,
Wyświetl pełny transkrypt i uzyskaj dostęp do tysięcy filmów naukowych