JoVE Encyklopedia Eksperymentów
Neuronauka
0 wyświetleń • 2:16 min. • July 8th, 2025
Weź płytkę wielodołkową pokrytą macierzą zewnątrzkomórkową lub ECM.
Do oddzielnych studzienek wprowadzić nietransgeniczne i transgeniczne ludzkie pluripotencjalne komórki macierzyste lub hPSC do pożywki hodowlanej.
Transgeniczne hPSC przenoszą transgen pod promotorem indukowanym antybiotykami. Transgen koduje czynnik transkrypcyjny, który indukuje różnicowanie neuronalne.
Inkubować w celu ułatwienia przylegania komórek do ECM. Małe cząsteczki w pożywce zapobiegają apoptozie, sprzyjając proliferacji komórek.
Dodaj roztwór odłączający, aby dysocjować komórki; dodaj pożywkę, aby zatrzymać dysocjację, a następnie przenieś je na inną mikropłytkę pokrytą ECM, aby umożliwić proliferację komórek.
Wprowadzić pożywkę różnicowania neuronalnego zawierającą małe cząsteczki do komórek nietransgenicznych, a antybiotyk induktor do komórek transgenicznych.
Małe cząsteczki indukują nietransgeniczne komórki do różnicowania się w neuronalne komórki progenitorowe lub NPC. W komórkach transgenicznych indukowana antybiotykiem ekspresja czynnika transkrypcyjnego aktywuje geny wymagane do różnicowania się w NPC.
Utrzymuj NPC w kulturze dla dalszych zastosowań.
Aby uzyskać informacje na temat generowania ni
Wyświetl pełny transkrypt i uzyskaj dostęp do tysięcy filmów naukowych