Generowanie komórek podobnych do komórek Schwanna z komórek zrębu szpiku kostnego

Rozpocznij od przylegającej hodowli komórek zrębu szpiku kostnego.

Poddaj komórki niedotlenieniu, stanowi charakteryzującemu się obniżonym poziomem tlenu, przez wymagany czas.

Wyizolować komórki kondycjonowane hipoksją, a następnie odwirować i usunąć supernatant. Ponownie zawiesić komórki w neuronalnych pożywkach progenitorowych zawierających neuronalne czynniki wzrostu.

Przenieś komórki na płytkę hodowlaną o niskim przyczepieniu i inkubuj.

Kondycjonowanie hipoksji i czynniki wzrostu neuronów indukują różnicowanie komórek zrębu w komórki progenitorowe neuronów.

Powierzchnia płytki o niskim przyleganiu utrzymuje przodków w zawieszeniu, ułatwiając ich proliferację i agregację w trójwymiarowe neurosfery.

Zbierz neurosfery, odwiruj i usuń supernatant. Ponownie zawiesić komórki w pożywkach indukcyjnych glejowych zawierających specyficzne dla gleju czynniki wzrostu.

Przenieś neurosfery na płytkę hodowlaną pokrytą lamininą, składnikiem macierzy zewnątrzkomórkowej i poli-D-lizyną, dodatnio naładowanym polimerem syntetycznym.

Powlekana powierzchnia wspomaga adhezję komórek, ułatwiając przyczepianie się do neurosfery.

Specyficzne dla gleju czynniki wzrostu stymulują różnicowanie neuronalnych