Bezpośrednie przeprogramowanie hematopoetycznych komórek progenitorowych w neuronalne komórki macierzyste

Zacznij od zawiesiny komórek genetycznie zmienionych hematopoetycznych komórek progenitorowych.

Komórki te wyrażają czynniki transkrypcyjne niezbędne do ich przeprogramowania w nerwowe komórki macierzyste. Ten proces nazywa się bezpośrednim przeprogramowywaniem.

Przenieś komórki na płytkę wielodołkową pokrytą macierzą zewnątrzkomórkową z neuronalną pożywką progenitorową i inkubuj.

Macierz zewnątrzkomórkowa zapewnia trójwymiarowe rusztowanie do przyczepiania i wzrostu komórek.

Podczas inkubacji czynniki transkrypcyjne wyrażane przez krwiotwórczą komórkę progenitorową inicjują sekwencję zdarzeń molekularnych, które umożliwiają jej przekształcenie w nerwową komórkę macierzystą.

Pożywka progenitorowa neuronalna zawiera czynniki, które sprzyjają przetrwaniu indukowanych nerwowych komórek macierzystych.

Po inkubacji zastąp tę pożywkę świeżą pożywką progenitorową neuronów, aby pobudzić namnażanie komórek.

Odłącz komórki za pomocą skrobaka do komórek.

Zebrać tę zawiesinę i przenieść komórki do studzienki zawierającej pożywkę z nerwowymi komórkami macierzystymi.

Inkubacja w celu utrzymania indukowanych nerwowych komórek macierzystych.

Gdy komórki są w 30 do 50% zlewne, odessaj supernatant i