Opracowanie modelu potrójnej hodowli komórkowej ludzkiej bariery krew-mózg

Zacznij od dodania perycytów do spodu wkładki studzienki.

Przykryj wkład studzienkowy płytką hodowlaną i inkubuj.

Perycyty przyczepiają się do błony wkładu studzienki, tworząc warstwę jednokomórkową lub monowarstwę.

Weź inną płytkę hodowlaną.

Dodaj ludzkie astrocyty do studzienki w odpowiednim podłożu. Następnie inkubuj płytkę.

Astrocyty przyczepiają się do dna studni i tworzą monowarstwę.

Wyrzuć pożywkę i dodaj świeże podłoże astrocytów i perycytów.

Teraz weź płytkę hodowlaną zawierającą wkładkę studzienkową z warstwą perycytów.

Odwróć płytkę i przenieś wkładkę studzienki do studzienki zawierającej warstwę astrocytów.

Dodaj komórki śródbłonka ludzkiego mózgu do górnej części wkładki studzienki i inkubuj.

Komórki śródbłonka przyczepiają się do wkładki studzienki, tworząc potrójny system hodowli komórek, który przypomina barierę krew-mózg, kluczowy interfejs oddzielający krwiobieg od mózgu.

Rozpocznij od hodowli HBVP w kolbach hodowlanych T75 z aktywowaną powierzchnią do adhezji komórek w inkubatorze z 5% dwutlenkiem węgla w temperaturze 37 stopni Celsjusza aż do konfluacji. Po osiągnięciu konfluencji odessać starą pożywkę pasożyta i umyć komórki 5 mililitrami ciepłego PBS firmy Dul