JoVE Encyklopedia Eksperymentów
Neuronauka
0 wyświetleń • 4:02 min. • July 8th, 2025
Zacznij od glejaków, agregatów komórkowych pochodzących z guza mózgu lub glejaka.
Dodaj enzymy dysocjacyjne. Inkubować w celu oddzielenia komórek glejaka i uzyskać zawiesinę jednokomórkową.
Następnie wprowadź pożywkę hodowlaną wzbogaconą surowicą, aby zatrzymać aktywność enzymu.
Odwirować i usunąć supernatant, a następnie ponownie zawiesić komórki.
Przefiltrować zawiesinę, następnie odwirować i usunąć supernatant.
Ponownie zawieś komórki w prekursorach hydrożelu, które zawierają małe peptydy.
Załaduj tę mieszaninę do studzienek za pomocą wstępnie zmontowanej formy silikonowej zawierającej kwas hialuronowy.
Wymieszaj roztwór. Inkubuj, aby umożliwić interakcję między kwasem hialuronowym a prekursorami hydrożelu, tworząc hydrożel, który ułatwia uwięzienie komórek.
Pokryj hydrożel pożywką hodowlaną, aby utrzymać przeżycie komórek.
Po zdemontowaniu formy inkubuj hydrożel.
W hydrożelu białka adhezyjne na komórkach oddziałują z peptydami prekursorowymi i kwasem hialuronowym.
Powoduje to, że komórki tworzą małe skupiska i rozwijają trójwymiarową kulturę.
Na początek umieść czyste, suche formy z gumy silikonowej w każdym dołku 12-dołkowej płytki niepoddanej hodowli tkankowej i użyj czystego
Wyświetl pełny transkrypt i uzyskaj dostęp do tysięcy filmów naukowych