JoVE Encyklopedia Eksperymentów
Neuronauka
0 wyświetleń • 4:22 min. • July 8th, 2025
Traktuj embrionalną tkankę śródmózgowia, bogatą w rozwijające się neurony dopaminergiczne, roztworem trypsyny-EDTA, aby odłączyć je od macierzy tkankowej.
Dodaj pożywkę dezaktywującą, aby zahamować aktywność enzymów, a następnie umyj, aby usunąć pozostałości enzymów.
Kilkakrotnie pipetować tkankę. Neurony embrionalne mają mniej projekcji, co zmniejsza stres podczas tego zaburzenia i generuje zawiesinę pojedynczej komórki.
Odwirować i usunąć supernatant, a następnie ponownie zawiesić neurony w kompletnym pożywce. Przenieś te neurony na pokryte polimerem szkiełko nakrywkowe w celu przyłączenia komórek.
Umieść szkiełko nakrywkowe na płytce wielodołkowej z kompletnym podłożem, dostarczającym składników odżywczych i czynników wzrostu niezbędnych do wzrostu neuronów.
Antybiotyki zawarte w pożywce zapobiegają rozwojowi bakterii, wspierając żywotność neuronów.
W miarę wzrostu i dojrzewania neurony rozwijają projekcje komórkowe, takie jak aksony i dendryty, tworząc połączenia synaptyczne.
Okresowo usuwaj połowę zużytych pożywek, aby wyeliminować toksyczne produkty uboczne.
Dodaj świeżą pożywkę do długotrwałego utrzymania neuronów dopaminergicznych.
Pod maską wyjmij HBSS z kolekcji brzuszneg
Wyświetl pełny transkrypt i uzyskaj dostęp do tysięcy filmów naukowych