JoVE Encyklopedia Eksperymentów
Neuronauka
0 wyświetleń • 2:16 min. • July 8th, 2025
Zacznij od płytki hodowlanej pokrytej syntetycznym polimerem i białkiem adhezyjnym.
Dodaj nerwowe komórki progenitorowe rdzenia kręgowego zawieszone w pożywce różnicującej neurony ruchowe, uzupełnione drobnocząsteczkowym inhibitorem.
Powlekana powierzchnia płytki ułatwia przyleganie komórek.
Małocząsteczkowy inhibitor blokuje specyficzne kinazy białkowe, zapobiegając apoptozie komórkowej.
Usuń zużytą pożywkę i dodaj świeżą pożywkę różnicującą.
Pożywka zawiera związek, który wspomaga różnicowanie progenitorów neuronów w progenitory neuronów ruchowych.
Dodatkowo pojawiają się przodkowie zaangażowani w glej.
Następnie zastąp pożywką różnicującą uzupełnioną inhibitorem syntezy DNA.
Inhibitory te selektywnie indukują uszkodzenie DNA i śmierć u progenitorów glejowych, podczas gdy progenitorzy neuronów ruchowych różnicują się w dojrzałe neurony.
Umyj komórki buforem i dodaj pożywkę różnicującą bez inhibitorów, aby utrzymać neurony.
Podczas hodowli regularnie wymieniaj podłoże, aby uzupełnić składniki odżywcze.
Dodatkowo zastąp pożywkę pożywką uzupełnioną białkiem adhezyjnym, aby wzmocnić przyczepienie neuronów, ustanawiając jednorodną kulturę neuronów ruchowych.
Jeśli hodowle neuronalnych
Wyświetl pełny transkrypt i uzyskaj dostęp do tysięcy filmów naukowych