Analiza interakcji między zarodkami zębów a zwojami nerwu trójdzielnego przy użyciu mikroprzepływowego systemu kohodowli

0 wyświetleń2:57 min • July 8th, 2025

Loading...
$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

Weźmy urządzenie mikroprzepływowe pokryte syntetycznym polimerem i białkiem adhezyjnym.

Urządzenie składa się ze studzienek i połączonych ze sobą komór hodowlanych oddzielonych mikrorowkami.

W komorach znajdują się wybite otwory do umieszczania tkanek.

Uzyskaj zwoje nerwu trójdzielnego, zbiór ciał komórek neuronu trójdzielnego i zarodki zębów, struktury prenatalne, które rozwijają się w zęby dorosłe, z zarodka myszy.

Umieść tkanki w otworach i dodaj odpowiednią pożywkę hodowlaną.

Składniki odżywcze i witaminy zawarte w pożywce zarodkowej zęba ułatwiają przetrwanie zarazków zębów podczas hodowli.

Powlekana powierzchnia urządzenia i czynniki wzrostu w ośrodku zwojów nerwu trójdzielnego ułatwiają wzrost neurytów i aksonów.

Aksony docierają do komory zarodkowej zęba przez mikrorowki.

Sygnały pochodzące z zębów prowadzą do odpychania neuronów, umożliwiając aksonom otoczenie zarodka zęba bez jego unerwiania.

Umyj komory hodowlane buforem i utrwalij tkanki utrwalaczem.

Kokultura jest teraz gotowa do dalszej analizy.

Po rozwarstwieniu zwojów nerwu trójdzielnego i zarodków zębów usuń lamininę z urządzeń mikroprzepływowych i napełnij komory 200 mikrolitrami odpowiednich mediów. Za pomocą kleszczy delikatnie przenieś wypreparowane zwoje nerwu trójdzielnego i zarodki zębów do otworów utworzonych za pomocą stempla biopsyjnego. Upewnij się, że zarodki zębów nie unoszą się na wodzie i toną, dopóki nie zetkną się ze szkiełkami nakrywkowymi.

Hoduj próbki w inkubatorze w temperaturze 37 stopni Celsjusza i 5% dwutlenku węgla. Zmieniaj pożywkę co 48 godzin przez 10 dni. Aby zmienić pożywkę, najpierw usuń pożywkę, kierując pipetę w stronę zewnętrznej strony studzienek. Następnie dodaj świeże, wstępnie podgrzane podłoże po stronie studzienek znajdujących się naprzeciwko komór.

W okresie hodowli należy w dowolnym momencie obrazować współkultury za pomocą mikroskopii świetlnej. Po okresie hodowli umyj komory, pipetując 150 mikrolitrów PBS do jednej studzienki na komorę i pozwalając PBS przepływać przez komory. Powtórz pranie w sumie trzy razy.

Po ostatnim płukaniu usunąć PBS i utrwalić próbki, pipetując 150 mikrolitrów 4% paraformaldehydu w PBS do jednej studzienki na komorę i pozwalając mu przepłynąć do drugiej komory. Inkubuj urządzenie w temperaturze pokojowej przez 15 minut. Następnie dwukrotnie umyj komory PBS i przystąp do dalszej analizy, takiej jak barwienie immunofluorescencyjne i obrazowanie wyrostka.

10:26

Przeprogramowanie obwodów neuronalnych: nowa metoda szybkiego wydłużania neurytów i funkcjonalnego połączenia neuronalnego

Powiązane filmy

0 Wyświetlenia

10:43

Opracowanie wolnych od surowicy ciał embrionalnych pochodzących z HiPSC do badania kultur 3-D komórek macierzystych przy użyciu fizjologicznie odpowiednich testów

Powiązane filmy

0 Wyświetlenia

09:11

Wysokorozdzielcze obrazowanie objętościowe neuronów z wykorzystaniem metody fluorescencji eXclusion oraz dedykowanych urządzeń mikroprzepływowych

Powiązane filmy

0 Wyświetlenia

09:34

Analiza obrazowa interakcji neuron-glej w systemie kohodowli neuronów i gleju opartym na platformie hodowli mikroprzepływowej (MCP)

Powiązane filmy

0 Wyświetlenia

04:27

Wspólna hodowla neuronów glutaminergicznego i pediatrycznych komórek glejaka o wysokim stopniu złośliwości

Powiązane filmy

0 Wyświetlenia

06:13

Ustanowienie wspólnej hodowli komórek miazgi zębowej i neuronów trójdzielnych do komunikacji krzyżowej

Powiązane filmy

0 Wyświetlenia

02:41

Ocena interakcji neuronów glutaminergicznego i komórek glejaka w kokulturze

Powiązane filmy

0 Wyświetlenia

09:06

Przygotowanie kokultur neuronalnych z precyzją pojedynczej komórki

Powiązane filmy

0 Wyświetlenia

08:01

Analiza rozwoju unerwienia zarodków zębów za pomocą urządzeń do kohodowli mikroprzepływowej

Powiązane filmy

0 Wyświetlenia

08:06

Metoda kohodowli do badania przerostu neurytów w odpowiedzi na sygnały parakrynne miazgi zębowej

Powiązane filmy

0 Wyświetlenia

Ostatnia aktualizacja: 1 sierpnia 2026