Różnicowanie nerwowych komórek macierzystych do neuronów za pomocą przedziałowego urządzenia mikroprzepływowego
JoVE Encyklopedia Eksperymentów
Neuronauka
0 wyświetleń • 4:12 min. • July 8th, 2025
Weźmy urządzenie mikroprzepływowe składające się ze studzienek zbiornikowych połączonych z dwoma komorami, somatyczną i aksonalną, oddzielonymi barierą mikrorowkową
.Przedziały i mikrorowki są pokryte substratem do hodowli komórkowych, aby ułatwić adhezję komórek.
Dodaj pożywkę z nerwowymi komórkami macierzystymi do każdej studzienki i inkubuj, aby przygotować urządzenie do hodowli komórek.
Wyrzuć nośnik. Dodaj nerwowe komórki macierzyste lub NSC do studzienek przedziału somatycznego i pozwól komórkom przylegać.
Dodaj pożywkę NSC do każdej studzienki i inkubuj w wilgotnej komorze, aby zapobiec parowaniu pożywki. Podczas inkubacji NSC namnażają się.
Zastąp pożywkę NSC pożywką do różnicowania neuronalnego i inkubuj.
Małe cząsteczki w pożywce indukują różnicowanie NSC w neurony w obrębie przedziału somatycznego, przy czym ich aksony rozciągają się przez mikrorowki do przedziału aksonalnego.
Zróżnicowane neurony z wydłużonymi aksonami są gotowe do dalszych testów.
Na początek rozpuść poli-l-ornitynę w wodzie destylowanej klasy do hodowli komórkowych, aby uzyskać 600 mikrolitrów roztworu na chip. Odessać pozostały PBS z dołków, upewniając się, że końcówka pipety znajduje się z dala od o
Wyświetl pełny transkrypt i uzyskaj dostęp do tysięcy filmów naukowych