Różnicowanie komórek ciała zarodka w progenitory nerwowe za pomocą kwasu retinowego

0 wyświetleń2:25 min • July 8th, 2025

Loading...
$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

Zacznij od embrionalnych komórek macierzystych hodowanych na warstwie komórek odżywiających fibroblasty, które utrzymują komórki macierzyste w stanie niezróżnicowanym.

Dodaj trypsynę, enzymy i EDTA, aby zakłócić adhezję między komórkami i odłączyć komórki.

Później dodaj pożywkę hodowlaną wzbogaconą surowicą, aby zatrzymać aktywność enzymu i przenieś zawiesinę komórkową do probówki.

Odwirować w celu zebrania komórek, usunąć supernatant, a następnie ponownie zawiesić komórki w pożywce zawierającej kwas retinowy.

Umieść kropelki tej zawiesiny komórkowej na dnie nieprzywierającej naczynia hodowlanego.

Odwróć podstawę, aby utworzyć wiszące krople i umieść ją nad pokrywką naczynia hodowlanego wypełnioną buforem, aby zapobiec wysychaniu kropel.

W wiszących kroplach grawitacja powoduje, że komórki osiadają na dnie, ostatecznie agregując się w trójwymiarowe struktury zwane ciałami embrionalnymi.

Ponadto komórki wchłaniają kwas retinowy, który moduluje różne wewnątrzkomórkowe szlaki sygnałowe.

Ta modulacja stymuluje różnicowanie komórek macierzystych w neuronalne komórki progenitorowe ze zdolnością do produkcji neuronów.

Rozpocznij tworzenie ciała zarodka od pobrania embrionalnych komórek macierzystych z 0,25% trypsyny-EDTA przez 2 do 5 minut w temperaturze 37 stopni Celsjusza, 5% dwutlenku węgla. Dodaj świeżą pożywkę Iscove's Modified Dulbecco lub IMDM z 15% FBS do oddzielających komórek, a następnie przenieś zawiesinę komórek do 15-mililitrowej probówki.

Wirować przy 160 x g przez 5 minut w temperaturze pokojowej. Następnie policz komórki za pomocą hemocytometru i przygotuj zawiesinę 5 x 105 komórek na mililitr w IMDM z 0,5 mikromolowym kwasem retinowym. Następnie użyj 8-kanałowej pipety i końcówek o pojemności 200 mikrolitrów, aby nanieść krople o pojemności 120 mikrolitrów na 100-mililitrową szalkę Petriego. Odwróć naczynie i napełnij odwróconą pokrywkę PBS, aby zapobiec wysychaniu wiszących kropli. Kultura w temperaturze 37 stopni Celsjusza, 5% dwutlenku węgla przez 3 do 4 dni.

07:13

Zastosowanie kwasu retinowego do uzyskiwania kultur osteocytów z pierwotnych osteoblastów myszy

Powiązane filmy

0 Wyświetlenia

11:05

Produkcja i podawanie terapeutycznych sferoid mezenchymalnych komórek macierzystych/zrębowych (MSC) przygotowanych w hodowlach 3D w warunkach wolnych od ksenotypów

Powiązane filmy

0 Wyświetlenia

08:01

Różnicowanie neuronalne na podstawie embrionalnych komórek macierzystych myszy in vitro

Powiązane filmy

0 Wyświetlenia

10:47

Efektywne wyprowadzanie ludzkich progenitorów neuronalnych i neuronów z pluripotencjalnych ludzkich embrionalnych komórek macierzystych z indukcją małych cząsteczek

Powiązane filmy

0 Wyświetlenia

01:56

Różnicowanie ludzkich embrionalnych komórek macierzystych w progenitory nerwowe

Powiązane filmy

0 Wyświetlenia

03:09

Generowanie progenitorów nerwowych z embrionalnych komórek macierzystych myszy metodą wiszącej kropli

Powiązane filmy

0 Wyświetlenia

02:22

Technika generowania nerwowych komórek progenitorowych z embrionalnych komórek macierzystych myszy

Powiązane filmy

0 Wyświetlenia

09:04

Analiza indukowanego kwasem retinowym różnicowania neuronalnego embrionalnych komórek macierzystych myszy w dwu- i trójwymiarowych ciałach embrionalnych

Powiązane filmy

0 Wyświetlenia

10:24

Różnicowanie embrionalnych komórek macierzystych myszy w prekursory interneuronów korowych

Powiązane filmy

0 Wyświetlenia

11:17

Efektywne różnicowanie neuronalne przy użyciu hodowli jednokomórkowej ludzkich embrionalnych komórek macierzystych

Powiązane filmy

0 Wyświetlenia

Ostatnia aktualizacja: 1 sierpnia 2026