JoVE Encyklopedia Eksperymentów
Neuronauka
0 wyświetleń • 2:25 min. • July 8th, 2025
Zacznij od embrionalnych komórek macierzystych hodowanych na warstwie komórek odżywiających fibroblasty, które utrzymują komórki macierzyste w stanie niezróżnicowanym.
Dodaj trypsynę, enzymy i EDTA, aby zakłócić adhezję między komórkami i odłączyć komórki.
Później dodaj pożywkę hodowlaną wzbogaconą surowicą, aby zatrzymać aktywność enzymu i przenieś zawiesinę komórkową do probówki.
Odwirować w celu zebrania komórek, usunąć supernatant, a następnie ponownie zawiesić komórki w pożywce zawierającej kwas retinowy.
Umieść kropelki tej zawiesiny komórkowej na dnie nieprzywierającej naczynia hodowlanego.
Odwróć podstawę, aby utworzyć wiszące krople i umieść ją nad pokrywką naczynia hodowlanego wypełnioną buforem, aby zapobiec wysychaniu kropel.
W wiszących kroplach grawitacja powoduje, że komórki osiadają na dnie, ostatecznie agregując się w trójwymiarowe struktury zwane ciałami embrionalnymi.
Ponadto komórki wchłaniają kwas retinowy, który moduluje różne wewnątrzkomórkowe szlaki sygnałowe.
Ta modulacja stymuluje różnicowanie komórek macierzystych w neuronalne komórki progenitorowe ze zdolnością do produkcji neuronów.
Rozpocznij tworzenie ciała zarodka od pobrania embrionalnych komórek ma
Wyświetl pełny transkrypt i uzyskaj dostęp do tysięcy filmów naukowych