JoVE Encyklopedia Eksperymentów
Neuronauka
0 wyświetleń • 6:26 min. • July 8th, 2025
Zacznij od płytki studzienkowej o niskim przyleganiu, zawierającej indukowane przez człowieka pluripotencjalne komórki macierzyste lub iPSC w pożywce z komórek macierzystych uzupełnionej inhibitorem kinazy Rho.
Inhibitory wnikają do komórek, blokują enzymy kinazy Rho i utrzymują żywotność komórek. Sprzyja to tworzeniu się agregatów iPSC.
Zastąp pożywkę pożywką z komórek macierzystych, aby umożliwić wzrost agregatów. Przenieś je do naczynia hodowlanego o niskim przyczepie z korową pożywką indukcyjną.
Składniki tej pożywki powodują, że iPSC różnicują się w komórki neuroektodermalne, prekursor neuronalny.
Przenieś każdy agregat neuroektodermalny na folię z płytkimi studzienkami.
Zastąp pożywkę matrycą z membraną podstawną i inkubuj, aby umożliwić zestalenie matrycy i uwięzienie agregatów.
Przenieść te zagregaty osadzone w matrycy do naczynia zawierającego pożywkę indukcyjną kory mózgowej i inkubować z mieszaniem.
Z biegiem czasu komórki neuroektodermalne wykorzystują czynniki różnicujące i przekształcają się w komórki neuronabłonkowe.
Zmień pożywkę na pożywkę różnicowania organoidów, która pozwala komórkom dojrzeć do bardziej wyspecjalizowanych typów komórek, tworząc organoid mózgowy
Wyświetl pełny transkrypt i uzyskaj dostęp do tysięcy filmów naukowych