Wzmacnianie różnicowania komórek macierzystych za pomocą przejściowego leczenia DMSO
JoVE Encyklopedia Eksperymentów
Neuronauka
0 wyświetleń • 2:18 min. • July 8th, 2025
Zacznij od płytki wielodołkowej zawierającej przylegające ludzkie pluripotencjalne komórki macierzyste ze zdolnością różnicowania wieloliniowego.
Wprowadzić pożywkę z komórek macierzystych zawierającą dimetylosulfotlenek lub DMSO.
DMSO dostaje się do komórek i zapobiega postępowi cyklu komórkowego od fazy Gap 1 lub G1, początkowego etapu cyklu komórkowego, do syntezy lub fazy S.
W ten sposób powstaje jednolita populacja komórek w fazie G1, zwiększając ich zdolność różnicowania.
Zastąp pożywkę bogatą w składniki odżywcze pożywką różnicującą ektodermę zawierającą inhibitory szlaków sygnałowych BMP i TGF-β.
Inhibitory te wiążą się ze specyficznymi receptorami ALK na komórkach macierzystych, blokując szlaki sygnałowe BMP i TGF-β oraz zapobiegając ich różnicowaniu się w prekursory endodermy i mezodermy.
Pozwala to na selektywne różnicowanie komórek macierzystych zatrzymanych przez G1 w ektodermalne prekursory posiadające zdolność różnicowania neuronalnego.
Regularnie wymieniaj pożywkę na świeżą pożywkę, aby utrzymać poziom składników odżywczych i czynników różnicujących, zapewniając przeżycie komórek.
Wstępnie potraktuj komórki DMSO zgodnie z opisem dla kultur 2D i przygotuj roztwory po
Wyświetl pełny transkrypt i uzyskaj dostęp do tysięcy filmów naukowych