JoVE Encyklopedia Eksperymentów
Neuronauka
0 wyświetleń • 3:06 min. • July 8th, 2025
Weź zawiesinę komórek nerwowych, w tym niedojrzałe oligodendrocyty i pierwotne komórki neuronalne, od szczeniaka myszy.
Ponownie zawieś komórki w magnetycznym buforze do sortowania komórek, aby uniknąć zlepiania się komórek.
Dodaj zmodyfikowane mikrokulki magnetyczne niosące na swojej powierzchni przeciwciała anty-O4. Wymieszać roztwór, aby zapewnić równomierne wymieszanie.
Inkubować, aby umożliwić mikrogranulkom wiązanie się z siarczanowanym galaktolipidem, antygenem O4 na oligodendrocytach, podczas gdy inne komórki pozostają niezwiązane lub luźno związane.
Umyj mieszaninę dodatkowym buforem do sortowania komórek.
Odwirować i wyrzucić supernatant, a następnie ponownie zawiesić komórki.
Następnie przełóż komórki związane z koralikami do kolumny separacji magnetycznej wyposażonej w filtr, który usuwa większe grudki komórek.
Podczas biegu, pod wpływem pola magnetycznego, kompleksy związane z koralikami poruszają się w kierunku magnesu, przyczepiając się do boków.
Umyć, aby usunąć niezwiązane i luźno związane komórki.
Pobrać kolumnę z separatora i przemyć ją pożywką proliferacyjną w celu zebrania pierwotnych oligodendrocytów do przyszłych zastosowań.
Po zliczeniu ponownie odwirować ko
Wyświetl pełny transkrypt i uzyskaj dostęp do tysięcy filmów naukowych