Przeprogramowanie losu komórki komórek rozrodczych nicieni na neurony
JoVE Encyklopedia Eksperymentów
Neuronauka
0 wyświetleń • 2:59 min. • July 8th, 2025
Weźmy genetycznie modyfikowane bakterie na pożywce dla nicieni.
Bakterie są nosicielami plazmidu z genem czynnika regulującego chromatynę nicieni.
Pożywka zawiera induktor, który wyzwala ekspresję transgenicznej polimerazy RNA z genomu bakteryjnego, który transkrybuje gen czynnika regulującego chromatynę do dsRNA.
Dodaj transgeniczne larwy nicieni przenoszące gen czynnika transkrypcyjnego indukującego los neuronów pod promotorem szoku cieplnego.
Po spożyciu przez bakterie spożyte dsRNA generuje siRNA, które obniża ekspresję czynnika regulującego chromatynę, ułatwiając przeprogramowanie losu komórki.
Poprzez komórki rozrodcze rodziców siRNA jest przekazywane potomstwu.
Regulacja w dół ekspresji czynnika regulującego chromatynę w potomnych komórkach rozrodczych, na co wskazuje fenotyp wystającego sromu, umożliwia ich przeprogramowanie.
Zastosuj szok cieplny do potomstwa, aktywując promotor szoku cieplnego i wyrażając czynnik transkrypcyjny indukujący los neuronów, który wyzwala różnicowanie neuronów, przekształcając komórki rozrodcze w neurony.
Neurony wyrażają transgeniczne fluorescencyjne białko reporterowe, ułatwiając mikroskopową wizualizację.
Ręcznie przenieś 50 robaków L4 na re
Wyświetl pełny transkrypt i uzyskaj dostęp do tysięcy filmów naukowych