Przygotowanie plasterków kory nosa i hipokampa z mózgu szczeniaka szczura

Weź świeżo zebrany mózg szczeniaka szczura, grzbietową stroną do góry, na płytkę hodowlaną ze schłodzonym buforem.

Otwórz półkule mózgowe i usuń tkanki pokrywające hipokamp.

Naciąć półkule tak, aby zawierały hipokampy i korę nosa.

Umieść obie półkule hipokampem skierowanym do góry i równolegle na bibule filtracyjnej.

Przenieś ten zespół do rozdrabniacza tkanek z ostrzem prostopadłym do półkul.

Pokrój półkule na wymaganą grubość, aby uzyskać plastry i przenieś je na płytkę hodowlaną ze schłodzonym buforem.

Ostrożnie oddziel plastry i rozdziel je tak, aby zawierały strukturalnie nienaruszone obszary kory hipokampa i nosa.

Przenieść plastry do błoniastych wkładek na płytce wielodołkowej zawierającej pożywkę.

Usuń nadmiar buforu z plastrów i inkubuj je w celu odzyskania tkanek.

Odśwież nośnik. Plasterki można wykorzystać do dalszej analizy.

Przenieś mózg, grzbietową stroną do góry, na 60-milimetrową płytkę zawierającą 5 mililitrów zimnego GBSS. Włóż cienkie kleszcze do móżdżku i włóż szpatułkę wzdłuż linii środkowej, aby ostrożnie otworzyć półkulę. Użyj krótkich, zakrzywionych kleszczy, aby ostrożnie usunąć nadmiar tkanki pokrywającej hipokamp bez dotykania struktury hipokampa. Następn