JoVE Encyklopedia Eksperymentów
Neuronauka
0 wyświetleń • 2:29 min. • July 8th, 2025
Weź szkiełko nakrywkowe zawierające wzorzystą hodowlę neuronów 1D.
Neurony są naładowane barwnikiem wskaźnikowym wapnia, który fluoryzuje po związaniu wapnia.
Przenieś szkiełko nakrywkowe do komory obrazowania mikroskopu fluorescencyjnego zawierającej zewnątrzkomórkowy roztwór zapisu.
Zamontuj uchwyt z dwoma równoległymi drutami elektrodowymi oddalonymi od siebie o pewną odległość.
Odwróć uchwyt i umieść go nad kulturą neuronalną z elektrodami zanurzonymi w roztworze rejestrującym.
Podłącz elektrody do amplifier. Zastosuj bipolarną dwubiegunową falę prostokątną bez prądu stałego, aby wygenerować jednolite jednokierunkowe pole elektryczne w neuronach bez powodowania obrażeń.
Wytworzone pole elektryczne pobudza neurony, wyzwalając potencjał czynnościowy.
Potencjał czynnościowy przemieszcza się wzdłuż aksonu, aktywując kanały wapniowe bramkowane napięciem i powodując napływ wapnia do zakończenia neuronu. Ponadto neuroprzekaźniki są uwalniane do synapsy, ułatwiając transmisję synaptyczną.
Po napływie jonów wapnia jony te wiążą się z barwnikiem wewnątrzkomórkowym i fluoryzują, wskazując na aktywność neuronów w odpowiedzi na stymulację elektryczną.
Przed elektrostymulacją umieść osadzone
Wyświetl pełny transkrypt i uzyskaj dostęp do tysięcy filmów naukowych