Rejestracja potencjału pola lokalnego z obu półkul mózgu myszy

Zacznij od znieczulonej myszy z głową zabezpieczoną w ramie stereotaktycznej.

Gol i sterylizuj skórę głowy.

Wykonaj nacięcie i usuń pozostałą tkankę, aby odsłonić czaszkę.

Oczyść czaszkę środkiem dezynfekującym i wywierć otwory w miejscach docelowych.

Usuń zewnętrzną warstwę mózgu.

Włóż mikroelektrody wypełnione roztworem jonowym do otworów pod żądanym kątem.

Opuść obie mikroelektrody do docelowych współrzędnych mózgu.

Przetestuj rezystancję elektrod i dostosuj ustawienia nagrywania, aby zapewnić niezawodne pozyskiwanie lokalnego potencjału pola lub danych LFP.

LFP odzwierciedla zmiany napięcia wynikające ze zbiorowej aktywności wielu neuronów w małym obszarze.

Rejestruj LFP z obu półkul, aby porównać aktywność neuronalną między nimi.

Przed zabiegiem potwierdź głębokość znieczulenia myszy, wykonując szczypanie ogona lub palca u nogi kleszczami. Następnie umieść mysz w aparacie stereotaktycznym i zamocuj jej głowę. Nałóż maść na oba oczy, aby były wilgotne.

Następnie ogol głowę i wysterylizuj obszar. Wykonaj małe nacięcie od 12 do 15 milimetrów w środku ogolonego obszaru. Za pomocą kleszczy delikatnie odciągnij skórę głowy od linii środkowej. Następnie delikatnie oddziel skórę i usuń pozostałą tkankę.

Oczyść czaszkę za pomocą patyczków kosmetycznych pokrytych nadtlenkiem wodoru. Pod mikroskopem stereoskopowym wywierć dwa małe otwory o promieniu od 1 do 1,5 milimetra po lewej i prawej stronie czaszki, aby umożliwić wprowadzenie rejestrujących mikroelektrod do obszarów M2.

Ostrożnie usuń oponę twardą za pomocą wolframowej igły, a następnie włóż dwie oddzielne mikroelektrody rejestrujące wypełnione 0,5 molowym chlorkiem sodu do otworów pod kątem 60 stopni za pomocą mikromanipulatorów mechanicznych.

W przypadku nagrywania LFP powoli opuść lewą i prawą szklaną elektrodę do współrzędnych M2. W celu kontroli jakości przetestuj rezystancję każdej elektrody za pomocą wzmacniacza różnicowego. Następnie ustaw proces nagrywania na górnoprzepustowe 0,1 Hz i dolnoprzepustowe 1,000 Hz z 1,000-krotnym wzmocnieniem. Zbierz zdigitalizowane surowe dane LFP w stabilnym stanie przez co najmniej 60 sekund, przy czym mysz oddycha równomiernie z prędkością dwóch oddechów na sekundę w znieczuleniu.