Analiza zachowań związanych ze snem u myszy za pomocą elektroencefalogramu i zapisów elektromiogramu

Przymocuj znieczuloną mysz do ramy stereotaktycznej.

Zdezynfekuj ogoloną skórę, przykryj mysz zasłoną i wykonaj nacięcie w linii środkowej, aby odsłonić czaszkę.

Wywierć dwa otwory w czaszce w określonych współrzędnych stereotaktycznych.

Przygotuj zespół elektrod rejestrujących z czteropinowym nagłówkiem podłączonym do przewodów ze stali nierdzewnej.

Użyj dwóch przewodów ze jako elektroencefalogramu lub elektrod EEG do pomiaru aktywności elektrycznej mózgu.

Użyj pozostałych dwóch przewodów jako elektromiogramu lub elektrod EMG do pomiaru aktywności elektrycznej mięśni.

Wkręć elektrody EEG w otwory i przymocuj zespół elektrod do czaszki.

Włóż elektrody EMG do mięśni szyi.

Zamknij nacięcie szwami i pozwól myszy dojść do siebie.

Przenieś mysz do dźwiękoszczelnej komory nagrywania.

Podłącz zespół elektrod do nagrywającego i podłącz go do amplifier.

Rejestruj sygnały EEG i EMG, aby analizować różne fazy snu i czuwania u myszy.

Przed rozpoczęciem wysterylizuj wszystkie narzędzia chirurgiczne w sterylizatorze z gorącymi kulkami. Gdy potwierdzisz, że mysz jest znieczulona przez uszczypnięcie palca u nogi, zgol włosy na głowie i szyi.

Następnie przymocuj mysz do ramy stereotaktycznej i zamocuj głowę między dwoma nausznikami. Następnie nałóż maść okulistyczną na oczy, aby zapobiec wysuszeniu. Przystąp do oczyszczania ogolonej skóry peelingami na bazie alkoholu i jodu.

Następnie przetnij wzdłuż linii środkowej skalpelem, aby odsłonić czaszkę, i przymocuj skórę z boku za pomocą klipsów, aby obszar operacyjny był otwarty. Za pomocą frezu z węglików spiekanych z wiertłem 0,8 milimetra wykonaj dwa otwory. Umieść jeden otwór nad czołową częścią kory mózgowej. Umieść drugi otwór nad obszarem ciemieniowym prawej półkuli.

Następnie za pomocą śrubokręta jubilerskiego wkręć w otwory rejestrujące EEG ze stali nierdzewnej. Wkręć za pomocą zaledwie dwóch do dwóch i pół obrotu, aby uzyskać znieczulenie zewnątrzoponowe nad korą. nie powinny się poruszać po włożeniu. To bardzo ważne.

Teraz przymocuj zespół elektrod kołkami do góry do czaszki. Elektrody muszą być przymocowane prosto. Użyj bawełnianego wacika, aby zabezpieczyć pozycję elektrod i przyklej elektrodę za pomocą cyjanoakrylanu, a następnie cementu dentystycznego.

Następnie wykonaj małe otwory w mięśniu czworobocznym i włóż do nich elektrodę EMG. Następnie zszyj skórę jedwabną nicią o średnicy 0,1 milimetra. Teraz wyjmij mysz z ramki stereotaktycznej i umieść ją na poduszce grzewczej.

Podać myszy dootrzewnowe wstrzyknięcia ampicyliny i meloksykamu i monitorować mysz aż do odzyskania pozycji mostkowej. Następnie trzymaj mysz w spokoju.

Tydzień po wszczepieniu elektrod przenieś mysz do eksperymentalnej klatki w dźwiękoszczelnej komorze nagraniowej. Przymocuj zespół elektrody EEG/EMG w myszy do nagrywającego podłączonego do pierścienia ślizgowego.

Podłącz konwertera AD do filtra sygnału EEG/EMG amplifier podłączony do pierścienia ślizgowego. Użyj konwertera AD, aby przekonwertować sygnał na 128-hercowy sygnał cyfrowy, a na koniec nagraj sygnał do komputera.

Przyzwyczaj mysz do dwóch do trzech dni w komorze nagraniowej. Uruchom oprogramowanie do rejestracji EEG/EMG. Aby rozpocząć, kliknij kartę informacji o pliku danych i kliknij pole obok nazwy pliku. Wprowadź nazwę pliku i kliknij przycisk Zapisz. Następnie z zakładki warunki zapisu wybierz wszystkie kanały EEG/EMG, które mają być rejestrowane. Wybierz również częstotliwość próbkowania w tej zakładce.

Teraz w zakładce informacji o kanałach sprawdź, czy wybrane kanały są wyświetlane poprawnie. Po potwierdzeniu rozpocznij nagrywanie, wybierając najpierw zakładkę ustawień timera. Następnie kliknij Monitor, aby wyświetlić EEG i EMG. Jeśli sygnały są wyświetlane prawidłowo, ustaw czas rozpoczęcia i zakończenia nagrania w obszarze głównego timera. Następnie kliknij przycisk monitora, aby rozpocząć nagrywanie.