JoVE Encyklopedia Eksperymentów
Neuronauka
0 wyświetleń • 4:41 min. • July 8th, 2025
Zacznij od unieruchomionego wycinka mózgu w komorze nagraniowej.
Korzystając z oprogramowania mikroskopu sterowanego kamerą, ustaw ostrość na obszarze docelowym
Włącz światło wzbudzenia i zrób wiele zdjęć na różnych głębokościach.
Oprogramowanie wykrywa współrzędne komórek znakowanych fluorescencyjnie.
Teraz umieść wypełnioną roztworem pipetę krosową zawierającą elektrodę rejestrującą w komorze.
Użyj odpowiedniego oprogramowania do kalibracji elementów sterujących położeniem.
W dużym powiększeniu ponownie skalibruj elementy sterujące, aby precyzyjnie wycelować w fluorescencyjnie znakowaną komórkę.
Zaznacz współrzędne komórki docelowej.
Rozpocznij automatyczne opuszczanie pipety z plastrem.
Komputer monitoruje rezystancję za pomocą elektrody. Zastosuj ujemne ciśnienie, wzrost oporu spowodowany kontaktem pipety z błoną komórkową wskazuje na tworzenie się gigaseal
.Następnie oprogramowanie jeszcze bardziej zmniejsza ciśnienie potrzebne do przebicia błony komórkowej i uzyskania konfiguracji łaty obejmującej całą komórkę.
W tym kroku umieść jeden plasterek mózgu na środku komory nagraniowej. Ustabilizuj wycinek mózgu za pomocą plasterka, holdownu lub harfy. Aby wykryć komórkę fluorescen
Wyświetl pełny transkrypt i uzyskaj dostęp do tysięcy filmów naukowych