JoVE Encyklopedia Eksperymentów
Neuronauka
0 wyświetleń • 2:58 min. • July 8th, 2025
Zabezpiecz obudzoną mysz w ramce stereotaktycznej, ze srebrnym drutem włożonym do opony twardej i otworem odsłaniającym obszar mózgu, który przetwarza bodźce słuchowe.
Wlej roztwór leku do wielolufowej szklanej pipety wyposażonej w elektrodę wolframową i przymocuj ją do uchwytu ramy stereotaktycznej.
Włóż niepowlekane srebrne druty do beczek, upewniając się, że jeden koniec styka się z roztworem, podczas gdy drugi łączy się z urządzeniem kontrolującym uwalnianie leku.
Podłącz bieguny dodatnie i uziemiające przewodów nagrywających odpowiednio do elektrody wolframowej i srebrnego przewodu stykającego się z oponą twardą.
Umieść elektrodę wielolufową na powierzchni mózgu i zastosuj bodźce słuchowe.
Rejestruj aktywność neuronalną.
Następnie zastosuj prąd dodatni, aby uwolnić lek.
Lek dostaje się do mózgu i blokuje specyficzne receptory, zapobiegając hamującemu wiązaniu neuroprzekaźników i zwiększając pobudliwość neuronów.
Na koniec ponownie zastosuj bodźce słuchowe i zidentyfikuj zwiększoną odpowiedź neuronalną po leczeniu farmakologicznym.
W tej procedurze umieść ciało zwierzęcia w specjalnie wykonanym, wyściełanym pianką uwięziczu. Przymocuj sztyft do uchwytu przymocowanego do ramy stereotaktycznej. To dobry moment, aby dać zwierzęciu płynną nagrodę. Następnie przykryj ciało zwierzęcia bawełnianym kocem i luźno zapnij go za pomocą plastikowego cylindra półprzewodnika i taśmy klejącej.
Użyj strzykawki z elastyczną końcówką, aby napełnić beczki wybranymi lekami. Za pomocą mikromanipulatora umieść elektrodę wielolufową na jego uchwycie. Następnie umieść niepowlekany srebrny drut w każdej beczce, tak aby jeden koniec stykał się z roztworem, a drugi koniec był dostępny. Następnie podłącz te końce do urządzenia do mikrojonoforezy.
Następnie podłącz zacisk dodatni do końca elektrody wolframowej, a zacisk uziemiający do srebrnego drutu, który styka się z oponą twardą. Następnie przesuń elektrodę wielolufową, aż końcówka zetknie się z powierzchnią mózgu. Zastosuj ciepłą sterylną sól fizjologiczną, aby zapobiec wysuszeniu tkanki mózgowej. W tym momencie zastosuj prąd retencyjny, aby uniknąć wycieku leku z końcówki lufy, szukając aktywności pojedynczej jednostki. Rejestruj aktywność neuronalną i jonoforetyczne zastosowanie gabazyny.