JoVE Encyklopedia Eksperymentów
Neuronauka
0 wyświetleń • 2:11 min. • July 8th, 2025
Weźmy genetycznie zmodyfikowane kokultury mysich brzusznych wycinków hipokampa i neuronów jądra półleżącego na szkiełku nakrywkowym.
Neurony hipokampa wystrzeliwują presynaptyczne zakończenia aksonów z nadekspresją nikotynowych receptorów acetylocholiny, tworząc synapsy z neuronami postsynaptycznego jądra półleżącego.
Neurony są naładowane barwnikiem wskaźnikowym wapnia do wewnątrzkomórkowych pomiarów wapnia.
Przenieść szkiełko nakrywkowe do komory mikroskopu konfokalnego wypełnionej buforem zawierającym jony wapnia.
Przechwytywanie fluorescencyjnych projekcji aksonalnych hipokampa jako kontroli.
Perfuzja nikotyny, która wiąże się z nikotynowymi receptorami acetylocholiny na neuronach hipokampa, wywołując napływ wapnia.
Jony wapnia wiążą się z barwnikiem wewnątrzkomórkowym, zwiększając fluorescencję.
Aksony hipokampa uwalniają pobudzające neuroprzekaźniki, inicjując transmisję synaptyczną w neuronach jądra półleżącego.
Umyć buforem w celu usunięcia nikotyny.
Z biegiem czasu aktywacja nikotynowego receptora acetylocholiny powoduje uwalnianie wapnia z zapasów wewnątrzkomórkowych, co prowadzi do zwiększonej fluorescencji barwnika i wskazuje na utrzymującą się sygnalizację wapniową wzd
Wyświetl pełny transkrypt i uzyskaj dostęp do tysięcy filmów naukowych