Wewnątrzkomórkowy zapis in vivo wrażliwości spektralnej komórek fotoreceptorowych u motyla

Zacznij od unieruchomionego motyla na platformie.

Pod mikroskopem preparacyjnym włóż elektrodę referencyjną przez aparat gębowy, aby dotrzeć do głowy, i przymocuj elektrodę do platformy.

Wykonaj małe nacięcie w rogówce i uszczelnij je, aby zapobiec wysuszeniu.

Używając krótkiego oświetlenia pod stereoskopem, umieść elektrodę rejestrującą wypełnioną roztworem jonowym nad rogówką.

Następnie opuść elektrodę do rogówki za pomocą mikromanipulatora, aby uzyskać dostęp do komórki fotoreceptorowej.

Znaczna zmiana napięcia na membranie wskazuje na kontakt elektrody z ogniwem.

Dostosuj owada do ciemności, wyłączając zewnętrzne źródła światła.

Zainicjuj błyski świetlne za pomocą generatora impulsów i skieruj światłowodowy w stronę oka.

Dostosuj położenie elektrody i światłowodowego, aż do uzyskania odpowiedzi depolaryzacyjnej.

Zapisz reakcje komórki na białe światło i kolorowe filtry, aby ocenić jej wrażliwość na różne długości fal świetlnych.

Aby przygotować próbkę, pod mikroskopem umieść pojedynczego motyla w małej plastikowej rurce z gorącym woskiem, tak aby głowa była nieruchoma i wystawała z jednego końca tuby. Następnie przymocuj trąbkę, czułki i skrzydła woskiem. Następnie przytrzymaj