Iniekcja doplastycznej w głąb ciała szklistego w celu ustanowienia modelu chorób oczu
1 października 2007
Iniekcja doszklistkowa jest powszechnie stosowaną techniką w badaniach nad naukami o widzeniu w kontekście chorób oczu lub jako metoda bezpośredniego zastosowania miejscowego leczenia. W tym filmie zaprezentowano protokół iniekcji doszklistkowej z użyciem strzykawki o pojemności 1ml z szklaną pipetą. Przedstawiono praktyczne wskazówki dotyczące unikania masywnych krwawień oraz uszkodzeń soczewki.
Witajcie, jestem TU z laboratorium Guso. Dzisiaj przedstawię Państwu sposób wykonywania iniekcji doplasmowej (do ciała szklistego), co pozwala na tworzenie modeli zwierzęcych lub zapobieganie progresji chorób oczu. Oto schemat obrazowy.
Aby pokazać miejsce wprowadzenia igły do czerwonego oka. Igłę wbija się do komory tylnej pod kątem 45 stopni względem powierzchni blizny. Stosując ten kąt 45 stopni, można uniknąć uszkodzenia soczewki.
Podczas wstrzyknięcia domięśniowego do ciała szklistego wykonujemy iniekcję wewnątrzgałkową z wykorzystaniem mikroskopu operacyjnego. Znieczulenie zostanie przeprowadzone za pomocą koktajlu ketaminy i ksylazyny. Zastosowane zostanie również znieczulenie miejscowe oraz maść z antybiotykiem.
Do iniekcji używamy pipet szklanych. Do ich przygotowania wykorzystujemy gotowy wyciągacz. Następnie należy usunąć bardzo ostry koniec pipety szklanej.
Możemy podłączyć do tego strzykawkę o pojemności 1 ml. Punkt połączenia uszczelnimy lakierem. Następnie za pomocą tej szklanej rurki możemy powoli i starannie pobrać 2 µL roztworu do wstrzyknięcia, a następnie umieścić próbkę pod mikroskopem.
Nanieś jedną kroplę znieczulenia miejscowego na powierzchnię, a następnie usuń nadmiar płynu. Użyj igły 30 G, aby przebić bliznę. Igła powinna być ustawiona prostopadle do powierzchni blizny, a do tkanki należy wprowadzić jedynie jej czubek.
W miejscu nakłucia widać wydostający się płyn. Delikatnie dociśnij, aby usunąć więcej treści, co pozwoli uzyskać więcej miejsca. Do tylnej komory czerwonego oka wprowadź końcówkę szklanej pipety pod kątem 45 stopni do powierzchni blizny.
Należy uważać, aby nie uszkodzić soczewki. Wstrzykiwać powoli. Nie wstrzykiwać żadnych pęcherzyków powietrza do Es. Po odczekaniu kilku sekund należy wyciągnąć igłę.
Następnie należy nałożyć maść z antybiotykiem na oko. Głównym wyzwaniem podczas iniekcji do ciała szklistego jest zminimalizowanie manipulacji przy oku. Musimy uniknąć krwawienia wewnątrzgałkowego, uszkodzenia soczewki oraz odwarstwienia siatkówki.
Wyświetl pełny transkrypt i uzyskaj dostęp do tysięcy filmów naukowych
Przegląd
Ten film prezentuje protokół wykonywania zastrzyków do ciała szklistego, powszechnie stosowanej techniki w badaniach nad naukami o widzeniu. Przedstawia on sposoby unikania powikłań, takich jak uszkodzenie soczewki i masywne krwawienie podczas procedury.
Kluczowe elementy badania
Dziedzina nauki
- Nauki o widzeniu
- Badania nad chorobami ocznymi
- Techniki wstrzykiwania
Wstęp
- Iniekcja dopaszczowa jest kluczowa dla miejscowego leczenia chorób oczu.
- Często stosuje się ją do tworzenia modeli zwierzęcych w badaniach.
- Właściwa technika jest niezbędna, aby uniknąć powikłań.
- Kąt wstrzyknięcia odgrywa istotną rolę w zapobieganiu uszkodzeniu soczewki.
Cel badania
- Zaprezentowanie prawidłowej techniki wtryskiwania do ciała szkliwatego.
- Przedstawienie wskazówek dotyczących minimalizacji ryzyka podczas zabiegu.
- Pogłębienie zrozumienia metod leczenia chorób oczu.
Zastosowane metody
- Użycie strzykawki 1 ml z szklaną pipetą do wstrzykiwania.
- Wstrzykiwanie pod kątem 45 stopni do powierzchni blizny.
- Pomoce wizualne ilustrujące miejsce wstrzykiwania.
- Prezentacja technik pozwalających uniknąć powikłań.
Główne wyniki
- Skuteczna demonstracja techniki iniekcji doplastycznej do ciała szklistego.
- Wskazówki dotyczące unikania uszkodzenia soczewki oraz krwawień.
- Przejrzysta wizualizacja procesu iniekcji.
- Efektywne przekazywanie praktycznych wskazówek dotyczących procedury.
Wnioski
- Iniekcja do ciała szklistego jest cenną techniką w badaniach okulistycznych.
- Prawidłowa technika ma kluczowe znaczenie dla osiągnięcia pomyślnych rezultatów.
- Pomoce wizualne ułatwiają zrozumienie i wykonanie procedury.
Często zadawane pytania
Znaczenie dla przemysłu
Iniekcja doplastyczna do ciała szklistego umożliwia precyzyjne dostarczenie środków terapeutycznych do jamy ciała szklistego, wspierając opracowywanie modeli chorób oczu oraz ocenę lokalnego leczenia. Technika ta ogranicza ekspozycję systemową i zwiększa stopień oddziaływania na cel w badaniach przedklinicznych. Opanowanie tej metody poprawia powtarzalność i zmniejsza zmienność w ocenach farmakologicznych i toksykologicznych w obrębie oka.
Strategiczne zastosowania w badaniach i rozwoju biofarmaceutycznym
Wczesne odkrywanie i walidacja celu
- Wartość naukowa: Umożliwia funkcjonalne badanie celów ocznych poprzez miejscowe dostarczanie związków w modelach istotnych dla danej choroby.
- Wartość operacyjna: Wspiera weryfikację hipotez poprzez oddzielenie farmakokinetyki wewnątrzgałkowej od czynników zakłócających o charakterze systemowym.
Przesiewy i opracowanie testu
- Wartość naukowa: Zapewnia ustandaryzowaną metodę analizy zależności dawka-odpowiedź dla związków podawanych wewnątrzgałkowo in vivo.
- Wartość operacyjna: Umożliwia powtarzalne przygotowanie narzędzi do iniekcji z wykorzystaniem łatwo dostępnych materiałów, takich jak pipety szklane i strzykawki 1 mL.
Badania translacyjne i przedkliniczne
- Wartość naukowa: Wspiera badania nad farmakokinetyką i biodystrybucją, które są kluczowe dla modelowania translacyjnego terapeutyków okulistycznych.
- Wartość operacyjna: Umożliwia spójne generowanie modeli w różnych laboratoriach dzięki standaryzacji kąta wstrzyknięcia i wyboru miejsca podania.
Integracja potoku i przepływu pracy
Metoda ta wpisuje się w kontinuum odkrywania leków okulistycznych – od walidacji celu po przedkliniczne testy skuteczności – umożliwiając bezpośrednie dostarczanie związków do odcinka tylnego oka.
- Biologia odkrywcza: Wspiera walidację zaangażowania celu poprzez dostarczanie agonistów, antagonistów lub kwasów nukleinowych do ciała szklistego.
- Przesiewy: Umożliwia przesiewowe badanie związków in vivo poprzez zapewnienie kontrolowanej, zlokalizowanej drogi podania.
- Analityka: Pozwala na ilościowe określenie poziomu leku wewnątrzgałkowo oraz zmian w biomarkerach po iniekcji.
- Badania translacyjne: Łączy etap odkryć z badaniami przedklinicznymi poprzez tworzenie powtarzalnych modeli chorób za pomocą podania dostresowego do ciała szklistego.
- Zastosowanie w przedsiębiorstwie: Możliwość ponownego wykorzystania w projektach dotyczących jaskry, degeneracji siatkówki oraz modeli zapalnych chorób oczu.
Wpływ operacyjny i przedsiębiorczy
- Wartość naukowa: Zwiększa pewność prognostyczną poprzez minimalizację zmienności proceduralnej i urazów gałki ocznej.
- Wartość operacyjna: Redukuje częstotliwość błędów technicznych dzięki standaryzacji przygotowania igły i kąta wstrzyknięcia.
- Wartość strategiczna: Usprawnia podejmowanie decyzji o kontynuacji lub przerwaniu badań (go/no-go) poprzez zapewnienie spójnej wierności modelu we wszystkich badaniach.
- Wpływ na portfolio: Wspiera dostosowane do ryzyka wdrażanie kandydatów na leki okulistyczne z walidowanym lokalnym dostarczaniem.
Uwagi dotyczące wdrożenia
- Wymaga przeszkolenia w zakresie technik mikrochirurgicznych oraz anatomii oka, aby uniknąć uszkodzenia siatkówki lub soczewki.
- Zależne od dostępu do mikroskopów do iniekcji, wyciągaczy szklanych pipet oraz sterylnych strzykawek 1 mL.
- Wymaga standaryzacji między zespołami w zakresie kąta igły (45°), miejsca wkłucia (górno-nosowo) oraz usuwania ciała szklistego.
- Adaptacja do różnych gatunków (np. myszy, szczura) wymaga ponownej kalibracji głębokości nakłucia i objętości iniekcji.
- Ograniczone przez zależność od umiejętności manualnych; automatyzacja pozostaje trudna ze względu na zmienność tkanek.
