JoVE Encyklopedia Eksperymentów
Neuronauka
0 wyświetleń • 3:45 min. • July 8th, 2025
Zacznij od naczynia zawierającego matrycę krzemową, która ma wiele małych kanałów podłączonych do portów wlotowych i wylotowych.
Wstrzyknąć badane białko o działaniu odpychającym, przez wlot w celu wypełnienia kanałów.
Inkubować, aby umożliwić przyleganie białka w obszarze kanału, tworząc strefy białka testowego, a następnie przemyć.
Usunąć matrycę, pokryć pokryty obszar białkiem kontrolnym o atrakcyjnej aktywności i inkubować.
Ułatwia to przyleganie białka kontrolnego do pustych obszarów między strefami białka testowego, tworząc strefy białka kontrolnego z naprzemiennym wzorem w paski, a następnie mycie.
Dodaj lamininę, aby pokryć obszar w paski, a następnie umyj.
Zasiej pokryty obszar jednokomórkową zawiesiną neuronów hipokampa i inkubuj.
W strefie białka testowego neurony oddziałują z białkami, wyzwalając sygnały, które powodują odpychanie neuronów, hamując ich przyczepienie.
W przeciwieństwie do tego, interakcje neuron-białko w strefie białka kontrolnego promują przyczepienie neuronów, wspierając ich wzrost i wydłużenie aksonów.
Przygotować znakowane fluorescencyjnie białka rekombinowane w PBS. Zrób 25 mikrolitrów na każde naczynie w paski. Pozostaw mieszaninę do inkubacji w te
Wyświetl pełny transkrypt i uzyskaj dostęp do tysięcy filmów naukowych