JoVE Encyklopedia Eksperymentów
Neuronauka
0 wyświetleń • 2:28 min. • July 8th, 2025
Weź znieczulone larwy danio pręgowanego do naczynia wyłożonego żelem agarozowym i upewnij się, że mózg jest skierowany do góry w celu wstrzyknięcia.
Umieść naczynie pod mikroskopem, aby uwidocznić komory mózgu, które są wypełnionymi płynem jamami w rozwijającym się mózgu.
Weź igłę do mikroiniekcji zawierającą roztwór lipopolisacharydów lub LPS, składnika bakteryjnego, aby wywołać odpowiedź immunologiczną.
Umieść igłę nad tektum mózgu, regionem zawierającym neurony i rezydujące komórki odpornościowe, w szczególności mikroglej.
Nakłuć mózg igłą i wstrzyknąć roztwór LPS do komory.
Mikroglej w otaczającej tkance wiąże się z LPS poprzez receptory toll-podobne.
Wiązanie wyzwala uwalnianie cytokin prozapalnych, które rekrutują neutrofile do tego miejsca, prowadząc do zapalenia nerwów.
Neutrofile generują wybuchy reaktywnych form tlenu i uwalniają enzymy proteolityczne, co powoduje śmierć neuronów.
Przenieś larwy wywołane zapaleniem nerwów do pożywki hodowlanej, aby utrzymać je do dalszych testów.
Ustawić mikromanipulator tak, aby końcówka igły aparatu do mikroiniekcji znajdowała się w tym samym polu widzenia, co larwy w dużym powiększeniu. Rozpuść roztwór 2% agarozy w podwójnie destylowan
Wyświetl pełny transkrypt i uzyskaj dostęp do tysięcy filmów naukowych