Ocena in vitro zagregowanego β amyloidu na zapadanie się stożka wzrostu neuronów

Rozpocznij od wielodołkowego szkiełka hodowlanego zawierającego neurony z zarodka myszy w pożywce.

Neurony wykazują stożki wzrostu na końcach swoich rosnących aksonów. Struktury te obejmują cienkie wypustki zwane filopodiami i arkuszowe przedłużenia zwane lamellopodiami, które składają się z włókien aktynowych i mikrotubul, składników cytoszkieletu.

Studzienki testowe należy potraktować zagregowanym białkiem β amyloidu lub Aβ, a studzienki kontrolne roztworem nośnika.

W studzienkach testowych zagregowany Aβ wiąże się z receptorami błonowymi, inicjując dalszą sygnalizację, która fosforyluje białka regulujące cytoszkielet.

Fosforylowane białka rozrywają filamenty aktynowe i mikrotubule, destabilizując integralność strukturalną stożka wzrostu i powodując jego zapadanie się.

Inkubuj z utrwalaczem, aby zachować strukturę komórkową, a następnie umyj komórki i zamontuj je do obrazowania.

Za pomocą mikroskopu porównaj struktury komórkowe w studzienkach testowych i kontrolnych.

Zwiększone występowanie zapadania się stożka wzrostu w neuronach traktowanych Aβ wskazuje na toksyczne działanie agregatów Aβ.

Rozpocznij ten test co najmniej tydzień wcześniej, otwierając świeżą fiolkę z uzyskanym w