JoVE Encyklopedia Eksperymentów
Neuronauka
0 wyświetleń • 3:33 min. • July 8th, 2025
Zacznij od wielodołkowej płytki bez dna przymocowanej do silikonowej membrany. Membrana jest pokryta biopolimerem, aby ułatwić adhezję komórek.
Wprowadź do studzienek indukowane przez człowieka pluripotencjalne neurony pochodzące z komórek macierzystych lub hiPSCN, zawieszone w pożywce. Pożywka jest uzupełniana macierzą zewnątrzkomórkową lub białkami ECM w celu zwiększenia adhezji komórek.
Inkubuj płytkę, pozwalając komórkom przylegać do białek ECM i biopolimeru, promując równomierną interakcję z powierzchnią błony.
Następnie zabezpiecz płytkę na etapie urządzenia do urazu.
Za pomocą urządzenia nałóż wgłębienie na membranę, aby wygenerować kontrolowane naprężenia mechaniczne na neuronach.
Stres zaburza pracę cytoszkieletu, co powoduje zwyrodnienie wypukłości komórkowych zwanych neurytami i powstawanie niewielkich obrzęków wzdłuż neurytów.
Stres uszkadza również integralność błony komórkowej, powodując śmierć komórki.
HiPSCN wykazujące fenotyp urazu rozciągającego są teraz gotowe do analizy.
Aby rozciągnąć płytę, zmień pola "Nazwa pliku" i "Ścieżka pliku" w instrumencie wirtualnym "Śledzenie pozycji" na unikalną nazwę pliku i kliknij strzałkę Uruchom. Ustaw głębokość i czas trwania
Wyświetl pełny transkrypt i uzyskaj dostęp do tysięcy filmów naukowych