Charakterystyka przestrzeni zewnątrzkomórkowej w wycinku mózgu za pomocą mikroelektrod jonoselektywnych i jonoforetycznych

Zacznij od komory rejestracyjnej zawierającej zabezpieczony gruby wycinek mózgu zanurzony w sztucznym płynie mózgowo-rdzeniowym lub aCSF.

Ten wycinek mózgu obejmuje płyn śródmiąższowy i macierz zewnątrzkomórkową, tworząc połączoną przestrzeń zewnątrzkomórkową otaczającą komórki mózgowe.

Zanurz dwukanałową mikroelektrodę jonoselektywną i mikroelektrodę jonoforetyczną w aCSF.

Dwukanałowa mikroelektroda jonoselektywna posiada kanał detekcyjny dla jonów tetrametyloamoniowych lub TMA oraz kanał odniesienia, podczas gdy mikroelektroda jonoforezy zawiera roztwór TMA.

Elektroda jonoforezy uwalnia jony TMA, które dyfundują w kierunku mikroelektrody jonoselektywnej.

Kanał detekcyjny wykrywa te jony TMA i generuje sygnał elektryczny. Zapisz to jako linię bazową.

Włóż obie elektrody do wycinka mózgu, trzymając je lekko w rozkroku.

Gdy jony TMA dyfundują przez przestrzeń zewnątrzkomórkową, docierają do mikroelektrody jonoselektywnej.

Ponownie nagraj sygnał i porównaj go z linią bazową, aby przeanalizować właściwości przestrzeni zewnątrzkomórkowej, takie jak ułamek objętościowy i stopień skręcenia.

Umieść wycinek mózgu o grubości 400 mikrometrów w komorze nagrywającej, upewniając się, że jest ca