Generacja modelu mysiego z infekcją ośrodkowego układu nerwowego

Rozpocząć od dwóch strzykawek wypełnionych różnymi objętościami pożywki zawierającej wirusy przeznaczone do zakażenia ośrodkowego układu nerwowego (OUN).

Trzymaj szczeniaka myszy w pozycji leżącej. Zdezynfekować głowę i wstrzyknąć mniejszą objętość roztworu wirusa domózgowo przez obszar lambda.

Dzięki temu wirusy mogą ominąć barierę krew-mózg i bezpośrednio dotrzeć do tkanki mózgowej.

Następnie przytrzymaj szczeniaka myszy w pozycji leżącej. Zdezynfekować i wstrzyknąć większą objętość roztworu wirusa do jamy brzusznej.

Ułatwia to ogólnoustrojowe rozprzestrzenianie się wirusa przez naczynia krwionośne, infekując inne części OUN.

Wstrzyknięte wirusy dostają się do komórek nerwowych i wykorzystują maszynerię gospodarza do replikacji, prowadząc do śmierci komórki.

Wirusy uruchamiają również układ odpornościowy, powodując zapalenie OUN i ustanawiając model infekcji OUN.

Przed rozpoczęciem procedury infekcji należy rozcieńczyć nieprzystosowany zapas wirusa dengi 2 do 1 razy 10 do piątej jednostki tworzącej płytkę na 40 mikrolitrów pożywki o stężeniu RPMI 1640. Następnie załaduj strzykawkę o pojemności 10,3 mililitra wyposażoną w igłę o rozmiarze 30 z 10 mikrolitrami rozcieńczonego wirusa i strzykawkę o pojemności 10,3 mililitra wyposażoną w igłę o rozmiarze 30 z 30 mikrolitrami wirusa na zwierzę.

W celu domózgowego dostarczenia wirusa, naciśnij wyrocznię między kciukiem a palcem wskazującym, aby delikatnie przytrzymać siedmiodniową ssącą mysz Instytutu Badań nad Rakiem w pozycji leżącej i wstrzyknąć 10 mikrolitrów objętości rozcieńczonego wirusa w obszar lambda na przecięciu szwu strzałkowego i lambdoidalnego. Po wstrzyknięciu domózgowym użyj kciuka i palca wskazującego, aby utrzymać mysz w pozycji leżącej i delikatnie dootrzewnowo wstrzyknąć 30-mikrolitrową objętość rozcieńczonego wirusa do jamy brzusznej myszy.