Ocena kolonizacji bakteryjnej w mózgu myszy po zakażeniu Listeria monocytogenes
JoVE Encyklopedia Eksperymentów
Neuronauka
0 wyświetleń • 2:18 min. • July 8th, 2025
Weźmy perfundowany mózg myszy w buforze.
Mózg jest zakażony oporną na streptomycynę bakterią Listeria monocytogenes, bakterią chorobotwórcze.
Etap perfuzji usuwa krew z mózgu, zapewniając, że pomiary obciążenia bakteryjnego odzwierciedlają obciążenie Listeria monocytogenes w tkance.
Następnie homogenizuj mózg za pomocą wysterylizowanego homogenizatora, aby rozbić tkankę i uwolnić bakterie.
Teraz przygotuj seryjne rozcieńczenia homogenatu mózgu za pomocą buforu.
Umieść te rozcieńczenia na płytkach agarowych do infuzji serca mózgu zawierających streptomycynę, antybiotyk.
Inkubuj płytki. Agar do infuzji serca mózgu dostarcza składników odżywczych do wzrostu Listeria monocytogenes, podczas gdy streptomycyna wybiera oporne bakterie, umożliwiając tworzenie się tylko kolonii Listeria opornych na streptomycynę.
Policz liczbę kolonii na płytce, aby określić jednostki tworzące kolonie, miarę żywotnego obciążenia infekcyjnego bakterii w mózgu.
Za pomocą kleszczy otwórz czaszkę, aby odsłonić mózg i umieść szpatułkę między spodem mózgu a podstawą czaszki, aby ostrożnie przenieść mózg do 15-mililitrowej rurki zawierającej 5 mililitrów PBS o temperaturze 4 stopni Celsjusza.
W komorze bezpieczeńst
Wyświetl pełny transkrypt i uzyskaj dostęp do tysięcy filmów naukowych