Model inwazji guza oparty na macierzy z wykorzystaniem kohodowli glejaka wielopostaciowego mikrogleju

0 wyświetleń3:23 min • July 8th, 2025

Zacznij od dodania zimnej zawiesiny glejaka i komórek mikrogleju, z których każda jest barwiona innym barwnikiem fluorescencyjnym, do zimnego roztworu matrycy polimerowej.

Zimny stan zapobiega przedwczesnej polimeryzacji matrycy.

Następnie przenieś mieszaninę do porowatej wkładki komory w płytce hodowlanej.

Inkubować, aby umożliwić polimeryzację matrycy, tworząc żel, który osadza komórki.

Dodaj pożywkę bez surowicy do wkładki i pożywkę wzrostową zawierającą surowicę do dołka poniżej, a następnie inkubuj.

Czynniki chemiczne zawarte w surowicy sprzyjają migracji komórek w kierunku pożywki bogatej w surowicę.

Dodatkowo mikroglej wydziela cząsteczki sygnałowe, które oddziałują z komórkami glejaka.

Zwiększa to migrację komórek glejaka do spodu porowatej wkładki, przypominając ich migrację z guza do otaczającej tkanki.

Usuń komórki z górnej części komory.

Teraz napraw pozostałe komórki utrwalaczem i umyj je buforem. Wyraźna fluorescencja komórek pomaga śledzić migrację komórek.

Rozmrozić matrycę w temperaturze czterech stopni Celsjusza przez noc. Następnie przygotować matrycę o stężeniu 10 mg/ml w odpowiednich podłożach na lodzie. Następnie zbierz oznakowane komórki do zawiesiny w matrycy, jak pokazano wcześniej. Następnie pipetuj 1,5 razy 10 do piątej komórki GL261 w objętości 150 mikrolitrów, plus pięć razy 10 do czwartej komórki mikrogleju w 50 mikrolitrach do 1,5-mililitrowej probówki do mikrofugi.

Dodaj 2 razy 10 do piątych komórek GL261 w objętości 200 mikrolitrów do oddzielnej 1,5-mililitrowej probówki do mikrofuge. Wiruj komórki w mikrofugach przez pięć minut w temperaturze 120 razy g. Następnie ponownie zawieś komórki w 200 mikrolitrach zimnej matrycy na lodzie.

Na tym etapie ważne jest, aby mieć gotową tackę na lód w okapie. Rurki na końcówkach lodu przechowuj w lodówce. Upewnij się, że wszystko jest schłodzone, aby zapobiec przedwczesnej polimeryzacji dojrzałego żelu.

Po ponownym zawieszeniu umieść 50 000 komórek w objętości 50 mikrolitrów na środku górnej komory wkładu komory o wielkości porów 8 mikronów. Następnie inkubuj go w temperaturze 37 stopni Celsjusza przez 30 minut, aby umożliwić polimeryzację. Po 30 minutach dodaj 200 mikrolitrów pożywki bez surowicy do górnej komory i 700 mikrolitrów surowicy zawierającej pożywkę do wzrostu komórek do dolnej studzienki.

Po inkubacji przez 48 godzin usunąć komórki z górnej części komory poprzez delikatne aspiracja. Zamocuj komory jak poprzednio i zastąp utrwalacz 500 mikrolitrami 1X PBS przed obrazowaniem komórek.

09:36

Testy obrazowania żywych komórek w celu zbadania migracji i inwazji komórek macierzystych glejaka wielopostaciowego guza mózgu

Powiązane filmy

0 Wyświetlenia

07:40

Model sferoidalny 3D glejaka wielopostaciowego

Powiązane filmy

0 Wyświetlenia

10:08

Wspólna hodowla komórek macierzystych podobnych do glejaka na neuronach wzorcowych w celu zbadania migracji i interakcji komórkowych

Powiązane filmy

0 Wyświetlenia

04:13

Współhodowla komórek glejaka na neuronach wzorcowych: technika monitorowania migracji komórek glejaka na neuronach hipokampa szczura in vitro

Powiązane filmy

0 Wyświetlenia

07:48

System kokultury z organotypowym wycinkiem mózgu i sferoidą 3D komórek rakowych

Powiązane filmy

0 Wyświetlenia

08:35

Organotypowy model hodowli warstwowej glejaka ludzkiego do badania migracji komórek nowotworowych i specyficznych dla pacjenta skutków leków przeciwinwazyjnych

Powiązane filmy

0 Wyświetlenia

09:23

Testy kokulturowe w celu zbadania stymulacji makrofagów i mikrogleju inwazji glejaka

Powiązane filmy

0 Wyświetlenia

05:45

Ilościowa immunohistochemia mikrośrodowiska komórkowego w resekcjach glejaka wielopostaciowego u pacjenta

Powiązane filmy

0 Wyświetlenia

07:39

Wspólna hodowla neuronów glutaminergicznego i pediatrycznych komórek glejaka o wysokim stopniu złośliwości w urządzeniach mikroprzepływowych w celu oceny interakcji elektrycznych

Powiązane filmy

0 Wyświetlenia

04:30

Fotopolimeryzowalny model inwazyjnego mikrośrodowiska glejaka z przepływem śródmiąższowym z kwasem hialuronowym i kolagenem

Powiązane filmy

0 Wyświetlenia

Ostatnia aktualizacja: 29 sierpnia 2026