Model inwazji guza oparty na macierzy z wykorzystaniem kohodowli glejaka wielopostaciowego mikrogleju

Zacznij od dodania zimnej zawiesiny glejaka i komórek mikrogleju, z których każda jest barwiona innym barwnikiem fluorescencyjnym, do zimnego roztworu matrycy polimerowej.

Zimny stan zapobiega przedwczesnej polimeryzacji matrycy.

Następnie przenieś mieszaninę do porowatej wkładki komory w płytce hodowlanej.

Inkubować, aby umożliwić polimeryzację matrycy, tworząc żel, który osadza komórki.

Dodaj pożywkę bez surowicy do wkładki i pożywkę wzrostową zawierającą surowicę do dołka poniżej, a następnie inkubuj.

Czynniki chemiczne zawarte w surowicy sprzyjają migracji komórek w kierunku pożywki bogatej w surowicę.

Dodatkowo mikroglej wydziela cząsteczki sygnałowe, które oddziałują z komórkami glejaka.

Zwiększa to migrację komórek glejaka do spodu porowatej wkładki, przypominając ich migrację z guza do otaczającej tkanki.

Usuń komórki z górnej części komory.

Teraz napraw pozostałe komórki utrwalaczem i umyj je buforem. Wyraźna fluorescencja komórek pomaga śledzić migrację komórek.

Rozmrozić matrycę w temperaturze czterech stopni Celsjusza przez noc. Następnie przygotować matrycę o stężeniu 10 mg/ml w odpowiednich podłożach na lodzie. Następnie zbierz oznakowane komórki do zawiesiny w matryc