Model in vitro do badania przenikania patogenów przez barierę krew-mózg i infekcji komórek mózgowych

Weźmy model bariery krew-mózg (BBB) in vitro składający się z dwóch przedziałów oddzielonych porowatą błoną.

Górny lub jasny przedział zawiera komórki śródbłonka mikronaczyniowego. Komórki te wyrażają ścisłe połączenia, naśladując śródbłonek bariery krew-mózg, który ogranicza przechodzenie komórek i cząsteczek.

Dolny lub abluminalny przedział zawiera neurony, astrocyty i mikroglej, reprezentujące miąższ mózgu.

Wprowadź wirusa neurotropowego do przedziału luminalnego, aby zasymulować infekcję przenoszoną przez krew i inkubować.

Wirus jest endocytozowany przez komórki śródbłonka, ulega transportowi wewnątrzkomórkowemu w pęcherzykach i jest uwalniany po stronie brzusznej.

Po inkubacji usunąć górną komorę. Pobrać próbkę pożywki od strony abluminalnej, aby ocenić ilość wirusa, potwierdzając pomyślne przejście warstwy śródbłonka.

Dodaj świeże podłoże i ponownie inkubuj.

Wirus dostaje się do komórek nerwowych poprzez endocytozę, replikuje się i uwalnia potomstwo wirusa.

Określ ilościowo zwiększoną zewnątrzkomórkową wiremię, aby potwierdzić neuroinwazję i replikację wirusa.

Po ustawieniu mini urządzenia BBB mózgu, jak pokazano, dodaj 3500 jednostek tworzących płytki nazębne francuskiego sz