JoVE Encyklopedia Eksperymentów
Neuronauka
0 wyświetleń • 2:42 min. • July 8th, 2025
Zacznij od znieczulonej i zabezpieczonej myszy.
Usuń włosy z szyi myszy i zdezynfekuj miejsce operowane.
Wykonaj nacięcie na szyi i cofnij leżący pod spodem mięsień i tchawicę, aby odsłonić prawą tętnicę szyjną wspólną.
Tętnica szyjna dostarcza natlenioną krew do mózgu.
Zawiąż dwa węzły wokół tętnicy, aby ograniczyć przepływ krwi w górę.
Zszyj nacięcie i przenieś mysz do komory o niskiej zawartości tlenu. Włóż sondę doodbytniczą, aby monitorować temperaturę ciała, a następnie wyreguluj lampę grzewczą, aby utrzymać odpowiednią temperaturę.
Niski poziom tlenu w komorze zmniejsza poziom tlenu we krwi myszy, tworząc stan niedotlenienia.
Po zszyciu tętnicy szyjnej dopływ krwi i tlenu do mózgu jest jeszcze bardziej zmniejszony. Prowadzi to do niedokrwienia, które powoduje uszkodzenie neuronów.
Stopniowo składniki krwi przylegają do ściany naczynia, tworząc skrzep lub skrzeplinę.
Utrudnia to przepływ krwi, zwiększając uszkodzenia neuronów i wywołując udar zakrzepowy.
Umieść 10-13-tygodniową, ważącą od 22 do 30 gramów mysz męską C57 black 6 na łóżku chirurgicznym. Po potwierdzeniu znieczulenia przez uszczypnięcie palca u nogi nałóż maść na oczy zwierzęcia. Rozciągnij cztery kończyny wzdłuż rolki szyi i zabezpiecz je taśmą medyczną.
Następnie za pomocą kremu do depilacji usuń włosy z szyi zwierzęcia i oczyść miejsce operacji. Teraz przesuń łóżko chirurgiczne pod mikroskopem preparacyjnym i wykonaj 0,5-centymetrowe prawe nacięcie szyjki macicy w skórze wzdłuż linii środkowej. Za pomocą cienkich kleszczy rozsuń tchawicę i mięsień, aby odsłonić prawą tętnicę szyjną wspólną i umieść pod tętnicą dwie wstępnie przycięte jedwabne szwy 5-0. Uważaj, aby oddzielić tętnicę szyjną od nerwu błędnego.
Żywy węzeł do wstępnie przyciętych jedwabnych szwów 5-0 na RCCA. Następnie użyj nylonowych szwów monofilamentowych 4-0, aby zamknąć skórę i szybko przenieś mysz do systemu hipoksji.
Umieść maskę na twarz na nosie i pysku zwierzęcia oraz na sondzie doodbytniczej, tak aby temperatura ciała wynosiła 37,5 stopnia Celsjusza przez cały czas porodu. Wyreguluj lampy grzewcze.