JoVE Encyklopedia Eksperymentów
Neuronauka
0 wyświetleń • 5:03 min. • July 8th, 2025
Weźmy ludzką pośmiertną tkankę móżdżku zawierającą warstwę komórek Purkinjego, granulek i komórek molekularnych.
Umieścić go na uchwycie na próbkę kriostatu zawierającym częściowo zamrożone podłoża do zatapiania.
Poczekaj, aż podłoże całkowicie zamarznie, zabezpieczając tkankę.
Przenieś ten zespół do ramienia tnącego kriostatu i pozwól tkance zaaklimatyzować się do temperatury kriostatu.
Przesuń tkankę bliżej ostrza i przytnij ją, aby odsłonić warstwy kory.
Umieść płytkę zabezpieczającą przed przewróceniem się nad ostrzem i uzyskaj sekcje móżdżku.
Przenieś te sekcje na szkiełko membranowe.
Inkubować w rosnących stężeniach etanolu w celu utrwalenia tkanek i odwodnienia.
Następnie inkubować w ksylenie.
Wysuszyć szkiełko i umieścić je na stoliku mikroskopu laserowego UV.
Umieść nasadkę zbierającą na tkance móżdżku.
Mikroskopowo skup się na komórkach Purkinjego.
Za pomocą lasera przechwyć i zbierz komórki Purkinjego do dalszej analizy.
Najpierw wytnij mały kawałek tkanki do cięcia, upewniając się, że przekrój składa się w około 95% z kory móżdżku. Umieść pozostałą tkankę z powrotem w suchym lodzie lub w zamrażarce w temperaturze minus 80 stopni Celsjusza. Następnie zacznij powoli dodaw
Wyświetl pełny transkrypt i uzyskaj dostęp do tysięcy filmów naukowych