JoVE Encyklopedia Eksperymentów
Neuronauka
0 wyświetleń • 2:10 min. • July 8th, 2025
Weźmy krążek międzykręgowy (IVD), strukturę przypominającą poduszkę znajdującą się między kręgami, z ogona bydlęcego.
Ustaw go pionowo i wstrzyknij rekombinowaną TNF-α, cytokinę prozapalną, do jądra miażdżystego (NP), żelowego rdzenia.
Wycofać strzykawkę do połowy i pociągnąć tłok, aby wytworzyć podciśnienie, zapobiegając cofaniu się TNF-α. Następnie wyjąć strzykawkę.
Umieść IVD w komorze bioreaktora zawierającej media i codziennie przykładaj intensywne obciążenie ciśnieniowe.
TNF-α wiąże się ze swoimi receptorami na komórkach NP, uruchamiając kaskadę sygnalizacyjną.
To aktywuje kaspazy inicjujące i katowe, które degradują białka komórkowe i indukują apoptozę.
TNF-α aktywuje również czynnik transkrypcyjny NF-κB, który indukuje ekspresję genów zapalnych, prowadząc do uwolnienia enzymów degradujących macierz zewnątrzkomórkową IVD.
Dodatkowo intensywne obciążenie ciśnieniowe wywołuje naprężenia mechaniczne, co dodatkowo pogarsza IVD.
Zmniejsza to wysokość IVD w porównaniu z nieleczoną grupą kontrolną, ustanawiając zwyrodnieniowy i prozapalny model wczesnego stadium choroby IVD.
Po pierwszym cyklu dynamicznego ładowania pierwszego dnia, należy bezpośrednio umieścić IVD na szalce Petrie
Wyświetl pełny transkrypt i uzyskaj dostęp do tysięcy filmów naukowych