JoVE Encyklopedia Eksperymentów
Neuronauka
0 wyświetleń • 3:55 min. • July 8th, 2025
Rozmrozić fragment zamrożonej tkanki mózgowej szczura.
Dodaj bufor i zmiel tkankę. Następnie przenieś go do probówki zawierającej bufor i wymieszaj.
Odwirować mieszaninę i wyrzucić supernatant.
Dodaj roztwór enzymu proteolitycznego do tkanki i ponownie go zawieś za pomocą pipety o dużej średnicy.
Inkubuj mieszaninę, aby rozbić macierz zewnątrzkomórkową, rozluźniając komórki nerwowe.
Odwirować mieszaninę i wyrzucić supernatant.
Ponownie zawiesić fragmenty tkanki w schłodzonym buforze i wielokrotnie je pipetować, aby zdysocjować komórki.
Poczekaj, aż zanieczyszczenia i niezdysocjowane komórki osiądą, a następnie przenieś zawiesinę jednokomórkową do nowej probówki.
Przenieś komórki do lodowatego etanolu i wymieszaj. Inkubuj je, aby utrwalić i przepuszczalnie komórki.
Odwirować zawiesinę i odrzucić supernatant.
Ponownie zawieś komórki nerwowe w zimnym buforze w celu dalszej analizy.
Aby zmielić tkankę, należy pozostawić próbki do rozmrożenia na zimnej szklanej płytce nie dłużej niż 1 minutę przed pokryciem próbek w jednej lub dwóch kroplach roztworu buforu A. Następnie, trzymając żyletkę całkowicie pionowo do płytki, zmiel tkankę 100 razy w każdym prostopadłym kierunku. Aby dokładnie z
Wyświetl pełny transkrypt i uzyskaj dostęp do tysięcy filmów naukowych