Modelowanie przerzutów guza mózgu poprzez wstrzyknięcie komórek rakowych do tętnicy szyjnej wewnętrznej

Zacznij od znieczulonej myszy z odsłoniętą wspólną tętnicą szyjną lub CCA.

CCA rozdziela się na tętnicę szyjną zewnętrzną, czyli ECA, dostarczającą krew do twarzy, oraz tętnicę szyjną wewnętrzną, czyli ICA, dostarczającą krew do mózgu.

Najpierw umieść szew wokół ECA i zaciśnij go.

Następnie dodaj ciasny szew na CCA poniżej miejsca wstrzyknięcia, aby zablokować przepływ krwi.

Włóż wilgotny pasek papieru pod CCA, aby uzyskać wsparcie.

Umieść luźny węzeł nad miejscem wstrzyknięcia, a następnie wstrzyknij komórki rakowe do CCA.

Ze względu na zszyty ECA, komórki przemieszczają się do ICA, aby dotrzeć do mózgu.

Po wstrzyknięciu należy usunąć igłę i zacisnąć dystalny węzeł CCA, aby zapobiec cofaniu się.

Na koniec przytnij szwy, usuń pasek, spłucz solą fizjologiczną i zamknij ranę.

Z biegiem czasu migrowane komórki rakowe rozprzestrzeniają się i rozwijają guzy w mózgu.

Umieść cienkie kleszcze pod tętnicą szyjną zewnętrzną i przełóż jedwabny szew 5-0 pod tętnicą. Zawiąż węzeł i zaciśnij szew i odetnij nadmiar linii. Umieść cienkie kleszcze pod wspólną tętnicą szyjną i przełóż jedwabny szew 5-0 pod tętnicą.

Zawiąż węzeł i zaciśnij szew w pozycji bliższej do proponowanego miejsca wstrzyknięcia. Odetnij nadmiar szwu, pozostawiając około 10 milimetrów linii. Wytnij i zwilż pasek jednorazowych wycieraczek o wymiarach około 10 na 5 milimetrów.

Złóż pasek i umieść go pod tętnicą szyjną w proponowanym miejscu wstrzyknięcia. Spowoduje to podparcie naczynia podczas wstrzyknięcia. Na tętnicy szyjnej wspólnej rostralnej do proponowanego miejsca wstrzyknięcia należy umieścić trzecie podwiązanie z luźnym węzłem. Jest on dokręcany dopiero po wstrzyknięciu.

Delikatnie porusz zawiesinę komórkową i narysuj 200 mikrolitrów zawiesiny komórkowej do strzykawki insulinowej za pomocą igły o rozmiarze 31. Załadować strzykawkę do sterownika strzykawki podłączonego do aktywującego pedału nożnego.

Przymocuj cienką kaniulę z igłą o rozmiarze 31 do strzykawki i zagruntuj linię. Sprawdź, czy tętnica szyjna jest dobrze ustawiona i pod ciśnieniem. Używając dwóch cienkich kleszczyków kątowych, z których jeden delikatnie napina się na końcu pierwszej ligatury, a drugi trzyma igłę o rozmiarze 31, powoli włóż igłę skosem do góry w światło naczynia krwionośnego, uważając, aby jej nie przebić.

Powoli wstrzyknij 100 mikrolitrów przygotowanej wcześniej zawiesiny komórkowej do tętnicy szyjnej wspólnej z prędkością 10 mikrolitrów na sekundę. Spowoduje to dostarczenie 2,5 razy 10 do piątych komórek do naczynia krwionośnego. Udane wstrzyknięcie można uwidocznić poprzez oczyszczenie krwi z naczynia krwionośnego tętnicy szyjnej.

Delikatnie podnieś i dokręć luźną ligaturę natychmiast po wyjęciu igły, aby zapobiec cofaniu się i krwawieniu. Przytnij nadmiar szwów i usuń kawałek zwilżonych, jednorazowych wycieraczek o niskiej zawartości kłaczków.

Używając pipety P200, przepłucz jamę chirurgiczną dwukrotnie 150 do 200 mikrolitrami sterylnej wody lub soli fizjologicznej. Po sprawdzeniu, czy nie ma krwawień, zmień położenie tkanki miękkiej, gruczołów ślinowych i skóry nad tętnicą szyjną i tchawicą. Zamknij warstwę skóry nacięcia za pomocą uchwytu na igłę do szwów, kleszczyków i wchłanialnego lub niewchłanialnego szwu monofilamentowego 6-0 w ciągły wzór.