JoVE Encyklopedia Eksperymentów
Neuronauka
0 wyświetleń • 2:52 min. • April 28th, 2025
Zacznij od wielodołkowej płytki zawierającej przylegające rekombinowane komórki ssaków w roztworze stymulacyjnym uzupełnionym lucyferyną, podłożem luminescencyjnym.
Inkubuj, aby umożliwić lucyferynie wejście do komórki.
Komórki te wyrażają receptory zapachowe związane z błoną w połączeniu z białkami węchowymi G i białkami transportującymi receptory.
Dodatkowo, komórki wyrażają cytoplazmatyczne białka Glosensor, białka luminescencyjne wrażliwe na cykliczne AMP.
<p style='margin-left:36pt; wyrównanie tekstu:justowanie;" >Dodaj odparowujący roztwór nawaniacza w przestrzeni między studzienkami i umieść płytkę w przyrządzie luminometrycznym wstępnie zrównoważonym tym samym środkiem nawaniającym.Rozpocznij pomiar luminescencji.
Cząsteczki odorantu wiążą się z receptorami zapachowymi komórek, aktywując sprzężone białko G i dysocjując podjednostkę α białka G, czyli Gα.
Zdysocjowana podjednostka Gα wiąże się z enzymem cyklazy adenylanowej osadzonym w błonie, aktywując go. Aktywowany enzym przekształca ATP w cykliczne AMP.
Te cykliczne AMP wiążą się z białkami glosensor, zmieniając ich konformację i umożliwiając wiązanie lucyferyny.
Ta interakcja wytwarza luminescencję, potwierdzając aktywację r
Wyświetl pełny transkrypt i uzyskaj dostęp do tysięcy filmów naukowych