JoVE Encyklopedia Eksperymentów
Neuronauka
0 wyświetleń • 3:59 min. • April 28th, 2025
Weź szkiełko zawierające utrwalone i przepuszczalne kriosekcje tkanki koronalnej szczura.
Obrysuj sekcje hydrofobowym pisakiem, aby stworzyć kontrolowane środowisko barwienia.
Przenieś skrawki do komory wilgotnościowej, aby zapobiec wysuszeniu odczynników i tkanek podczas kolejnych etapów.
Skrawki należy potraktować białkami surowicy, aby zablokować niespecyficzne miejsca wiązania.
Spłukać buforem, aby usunąć nadmiar białek surowicy.
Inkubować z pierwotnymi przeciwciałami skierowanymi przeciwko określonym białkom mikrogleju i neuronów.
Przemyć buforem w celu usunięcia niezwiązanych przeciwciał pierwszorzędowych.
Inkubować z przeciwciałami drugorzędowymi sprzężonymi z fluoroforem, które wiążą się z przeciwciałami pierwszorzędowymi.
Przemyć buforem w celu usunięcia niezwiązanych przeciwciał drugorzędowych. Następnie spłucz wodą podwójnie destylowaną.
Zastosuj wodne media montażowe, aby chronić sygnał fluorescencyjny, umieść szkiełko nakrywkowe i uszczelnij je.
Zobrazuj skrawki pod mikroskopem fluorescencyjnym, aby uwidocznić znakowany immunologicznie mikroglej i neurony.
Osusz krawędzie szkiełek i wykonaj odpychające płyny obramowanie wokół krawędzi szkiełka za pomocą pisaka, aby zapewnić równ
Wyświetl pełny transkrypt i uzyskaj dostęp do tysięcy filmów naukowych