JoVE Encyclopedia of Experiments
Neuronauka
0 wyświetleń • 4:47 min • April 28th, 2025
Zacznij od wypreparowanego zarodka Drosophila przymocowanego do szkiełka z taśmą wokół niego.
Neurony ruchowe muchy są fluorescencyjnie oznaczone do wizualizacji.
Używając mikroskopu, wizualizuj zarodek i umieść w pobliżu zarodka zielono-fluorescencyjną mikropipetę wypełnioną lipofilowym barwnikiem.
Przełącz na tryb jasnego pola, zetknij pipetą końcówkę docelowego aksonu, uwolnij kroplę barwnika, a następnie inkubuj.
Ze względu na ich lipofilową naturę i bliskość aksonów, barwniki selektywnie wnikają w bogatą w lipidy błonę docelowego aksonu.
Z biegiem czasu barwnik przemieszcza się wstecz, cofając się wzdłuż aksonalnej dwuwarstwy lipidowej w kierunku ciała neuronalnego, oznaczając projekcje neuronalne.
Usuń taśmę ze szkiełka i umieść szkiełko nakrywkowe.
Obserwuj slajd pod mikroskopem konfokalnym.