JoVE Encyklopedia Eksperymentów
Neuronauka
0 wyświetleń • 1:48 min. • April 28th, 2025
Weź wielokomorowy szkiełko z pokrytymi białkiem szkiełkami nakrywkowymi zawierającymi stałe i przepuszczalne obwodowe komórki nerwowe pochodzące z krwi, w tym neuronalne komórki progenitorowe, astrocyty i neurony.
Dodaj rozwiązanie blokujące, aby zablokować nieokreślone miejsca wiązania.
Inkubuj z przeciwciałami sprzężonymi z barwnikiem fluorescencyjnym, które wiążą się z określonymi białkami komórkowymi, umożliwiając identyfikację typów komórek nerwowych.
Przemyć buforem, aby usunąć niezwiązane przeciwciała.
Inkubuj z fluorescencyjnym barwnikiem jądrowym, aby zabarwić jądra.
Przenieś szkiełko nakrywkowe na szkiełko z nośnikiem montażowym. Następnie tak przygotowane szkiełko należy umieścić pod mikroskopem fluorescencyjnym wyposażonym w odpowiednie filtry.
Używając określonych długości fal światła, wzbudz barwniki fluorescencyjne, powodując ich emitację światła na dłuższych falach.
Emitowane sygnały fluorescencyjne odpowiadają znakowanym białkom komórkowym, wyraźnie podkreślając różne typy komórek nerwowych i potwierdzając różnicowanie przeprogramowanych komórek krwi.
Dodaj roztwór blokujący PBS i 5% BSA. Zablokuj komórki w temperaturze pokojowej na płycie kołyskowej na jedną godzinę. Pr
Wyświetl pełny transkrypt i uzyskaj dostęp do tysięcy filmów naukowych