Obrazowanie mikroskopowe neuronów w wycinku mózgu myszy przy użyciu metalicznego barwienia metodą Golgiego-Coxa

Zacznij od grubej części mózgu, która została wybarwiona roztworem Golgiego-Coxa w celu selektywnego przyciemnienia neuronów i wybarwiona fioletem krezylowym, aby podkreślić obszar mózgu.

Umieść je na szkiełku, które zostało wstępnie potraktowane środkiem czyszczącym w celu zwiększenia przezroczystości tkanki.

<p style='margin-left:36pt; wyrównanie tekstu:justowanie;" >Umieść szkiełko na stoliku mikroskopu, nałóż olej silikonowy i opuść soczewkę obiektywu, aż zetknie się z olejem.

Olej silikonowy odpowiada współczynnikowi załamania światła soczewki obiektywu i szkiełka, umożliwiając szczegółowe obrazowanie.

Skoncentruj się na próbce, a następnie dostosuj ekspozycję i balans bieli kamery, aby uzyskać optymalną jakość obrazu.

Skup się na górnej warstwie, aby ustawić górną granicę, a następnie na dolnej warstwie, aby ustawić dolną granicę.

Dostosuj odstępy między obrazami z wystarczającym nakładaniem się, aby uchwycić szczegóły projekcji neuronalnych.

Powtórz obrazowanie w różnych miejscach, aby uchwycić obszary zainteresowania, a następnie nałóż te obrazy, aby stworzyć trójwymiarową reprezentację neuronów.

Aby uchwycić stosy obrazów o wysokiej rozdzielczości obszaru zawierającego inte