JoVE Encyklopedia Eksperymentów
Neuronauka
0 wyświetleń • 4:02 min. • April 28th, 2025
Zacznij od znieczulonej myszy transgenicznej z okrągłym szklanym okienkiem obrazowania i płytką na głowę wszczepioną na jej czaszkę.
Komórki mikrogleju lub układu odpornościowego oraz neurony są znakowane białkami fluorescencyjnymi.
Następnie przymocuj mysz do stolika mikroskopu dwufotonowego.
Następnie wstrzyknij dootrzewnowo barwnik fluorescencyjny, aby zabarwić naczynia krwionośne na czerwono.
Wyczyść szklane okienko obrazowania, nałóż kroplę soli fizjologicznej i opuść obiektyw mikroskopu.
Następnie ustaw światło lasera, aby uchwycić obraz naczyń krwionośnych. Zapisz wzór rozgałęzień i współrzędne, aby później zlokalizować i zobrazować ten sam region.
Teraz ustaw laser tak, aby wzbudzał białka fluorescencyjne, powodując fluorescencję mikrogleju i neuronów.
Korzystając z zarejestrowanego wzoru rozgałęzień, zlokalizuj ten sam region i regularnie rejestruj obrazy komórek.
Sieć naczyniowa i neurony pozostają stabilne, podczas gdy zmiany pozycji mikrogleju w czasie odzwierciedlają dynamikę immunologiczną w odpowiedzi na aktywność neuronów.
Wywierć okrągły otwór około 4 milimetry w głąb czaszki za pomocą wiertła dentystycznego. Podczas wiercenia regularnie zwilżaj czaszkę sterylną solą
Wyświetl pełny transkrypt i uzyskaj dostęp do tysięcy filmów naukowych