JoVE Encyklopedia Eksperymentów
Neuronauka
0 wyświetleń • 2:48 min. • May 29th, 2025
Zacznij od zestawu mikroskopu fluorescencyjnego zawierającego unieruchomioną membranę z nerwami przeponowymi od transgenicznej myszy.
Połączenie nerwowo-mięśniowe przepony składa się z neuronu ruchowego, włókna mięśniowego i komórek Schwanna zawierających receptory acetylocholiny i kanały wapniowe.
Komórki te mają znakowane fluorescencyjnie receptory acetylocholiny i wyrażają wewnątrzkomórkowe wskaźniki wapnia.
Dołączony do zestawu rozdzielacz obrazu umożliwia jednoczesną wizualizację obu sygnałów fluorescencyjnych.
Nerw przeponowy jest umieszczony w elektrodzie ssącej w celu dostarczania bodźca elektrycznego.
Pod mikroskopem fluorescencyjnym uwidocznij receptory acetylocholiny, aby zidentyfikować połączenie nerwowo-mięśniowe.
Aby ustawić maksymalną podstawową fluorescencję, dodaj roztwór chlorku potasu, aby tymczasowo zdepolaryzować błonę komórkową. Powoduje to wewnątrzkomórkowy napływ wapnia, powodując wzrost fluorescencji wskaźników.
Dostosuj ustawienia jasności, aby zapobiec przesyceniu sygnału fluorescencji.
Po repolaryzacji zastosuj stymulację elektryczną, aby wywołać napływ wapnia do komórki i zarejestrować zmianę fluorescencji wewnątrzkomórkowej z dużą szybkością klatek.
Przy 20-
Wyświetl pełny transkrypt i uzyskaj dostęp do tysięcy filmów naukowych