JoVE Encyklopedia Eksperymentów
Neuronauka
0 wyświetleń • 3:34 min. • May 29th, 2025
Zacznij od wstępnie ustalonych stycznych odcinków spłaszczonych odcinków kory mózgowej. Umyć, aby usunąć ślady utrwalające.
Zabarwić skrawki roztworem diaminobenzydyny lub DAB i siarczanu niklowo-amonowego.
DAB dyfunduje do neuronów korowych i reaguje z oksydazą cytochromową w mitochondriach, tworząc ciemny osad. Siarczan niklowo-amonowy przyciemnia osad, zwiększając kontrast.
Dodaj paraformaldehyd, aby zatrzymać reakcję barwienia, a następnie spłucz.
Zamontuj sekcje na zjeżdżalni i odwodnij je roztworami etanolu.
Spłucz izopropanolem i ksylenem, aby oczyścić sekcję i poprawić przepuszczalność światła.
Nałóż podłoże montażowe i nałóż na nie szkiełko nakrywkowe.
Podczas obrazowania pod mikroskopem jasnego pola, w neuronach korowych, osady pochłaniają i rozpraszają światło, sprawiając, że wydają się ciemne.
W przeciwieństwie do tego, niepoplamione, oczyszczone obszary przepuszczają światło i wydają się jasne.
Ten kontrast uwypukla moduły korowe jako ciemne, niejednolite struktury na jaśniejszym tle, reprezentujące aktywne klastry neuronalne zaangażowane w przetwarzanie informacji sensorycznych.
Płukać tkankę przekroju w buforze HEPES przez 15 minut, delikatnie mieszając. Podczas prania p
Wyświetl pełny transkrypt i uzyskaj dostęp do tysięcy filmów naukowych