Obrazowanie mitochondriów neuronalnych za pomocą seryjnego skaningowego mikroskopu elektronowego typu block-face

0 wyświetleń3:25 min • May 29th, 2025

Loading...
$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

Weź przycięty, zatopiony w żywicy fragment tkanki mózgowej myszy zawierający hipokamp.

Sekcja jest barwiona metalami ciężkimi w celu zwiększenia kontrastu pod mikroskopem elektronowym.

Zamontuj sekcję na aluminiowym kołku za pomocą kleju cyjanoakrylowego.

Pokryj boki bloku koloidalną pastą ze srebra, aby stworzyć przewodzącą ścieżkę do aluminiowego kołka.

Zbadaj blok tkankowy za pomocą seryjnego skaningowego mikroskopu elektronowego (SBFSEM).

W SBFSEM ultramikrotom sekwencyjnie kroi blok na ultracienkie warstwy, podczas gdy wiązka elektronów o niskim napięciu skanuje odsłoniętą powierzchnię.

Detektor elektronów wstecznie rozproszonych rejestruje obrazy 2D o wysokiej rozdzielczości, odsłaniając mitochondria i otaczające je struktury komórkowe.

Za pomocą odpowiedniego oprogramowania dostosuj jasność i kontrast, aby poprawić klarowność obrazu.

Wyrównaj sekwencyjne obrazy, aby zrekonstruować objętość 3D tkanki mózgowej. Ta rekonstrukcja 3D umożliwia precyzyjne mapowanie morfologii mitochondriów, rozmieszczenia przestrzennego i ich relacji w przedziałach neuronalnych.

Przytnij próbki do obszaru zainteresowania i zamontuj je na aluminiowym kołku za pomocą żelującego kleju cyjanoakrylowego. Następnie pokryj próbkę pastą ze srebra koloidalnego wokół boków bloku, aby zapewnić przewodzącą ścieżkę do aluminiowego kołka. Zbadaj próbki tkanek za pomocą systemu skaningowego mikroskopu elektronowego wyposażonego w umieszczony w komorze stolik ultramikrotomu i detektor elektronów wstecznie rozproszonych o niskiej liczbie kilowoltów.

Zobrazuj próbki z tymi ustawieniami. Rozpocznij analizę, wybierając typ obrazu, a następnie 8-bitowy, aby przekonwertować obrazy na 8-bitowy format TIFF z oryginalnego, zastrzeżonego 16-bitowego. Jeśli automatyczna konwersja kontrastu i/lub jasności na tym etapie nie jest idealna dla obrazów, otwórz ponownie obrazy 16-bitowe i naciśnij przycisk Obraz. Dostosuj kontrast jasności.

Wybierz zakres, który działa dla wszystkich obrazów i naciśnij Zastosuj. Następnie wykonaj konwersję. Jeśli wystąpiły niedopuszczalne ruchy obrazu między plasterkami, wyrównaj stosy obrazów, wybierając Wtyczki, Rejestracja i liniowe wyrównanie stosu za pomocą SIFT i ustaw wyrównanie dla trybu tylko translacji, a nie dla sztywnej bryły.

Powiększ rozmiar płótna przed rejestracją, wybierając opcję Dostosuj rozmiar płótna. Możesz też zmniejszyć obraz do obszaru zainteresowania, wybierając żądany obszar, a następnie przycinając go. W razie potrzeby przeskaluj obrazy do mniejszego, łatwiejszego w obsłudze rozmiaru za pomocą obrazu j, a następnie wybierz obraz i skalę.

09:09

Ukierunkowane badania z wykorzystaniem mikroskopii elektronowej z blokiem szeregowym i mikroskopią elektronową ze zogniskowaną wiązką jonów

Powiązane filmy

0 Wyświetlenia

09:21

Obrazowanie mitochondriów i retikulum endoplazmatycznego za pomocą korelacyjnej mikroskopii świetlnej i objętościowej

Powiązane filmy

0 Wyświetlenia

09:21

Seryjna skaningowa mikroskopia elektronowa ze skaningiem blokowym (SBF-SEM) próbek tkanek biologicznych

Powiązane filmy

0 Wyświetlenia

08:57

Zogniskowane mielenie wiązki jonów i skaningowa mikroskopia elektronowa tkanki mózgowej

Powiązane filmy

0 Wyświetlenia

04:50

Neuromodulacja i transport mitochondrialny: obrazowanie na żywo w neuronach hipokampa przez długi czas

Powiązane filmy

0 Wyświetlenia

01:21

Skaningowa mikroskopia elektronowa ze skupioną wiązką jonów do rekonstrukcji 3D neuronów połączonych synaptycznie

Powiązane filmy

0 Wyświetlenia

04:11

Obrazowanie konfokalne ruchu mitochondriów w oligodendrocytach w organotypowych kulturach wycinków mózgu

Powiązane filmy

0 Wyświetlenia

07:47

Analiza mitochondriów mózgu za pomocą seryjnej skaningowej mikroskopii elektronowej

Powiązane filmy

0 Wyświetlenia

11:16

Seryjna skaningowa mikroskopia elektronowa typu block-face (SBEM) do badania kolców dendrytycznych

Powiązane filmy

0 Wyświetlenia

08:46

Trójwymiarowa technika wizualizacji ultrastrukturalnych zmian mitochondrialnych w komórkach raka trzustki

Powiązane filmy

0 Wyświetlenia

Ostatnia aktualizacja: 1 sierpnia 2026