JoVE Encyklopedia Eksperymentów
Neuronauka
0 wyświetleń • 4:42 min. • May 29th, 2025
Zacznij od znieczulonej transgenicznej larwy danio pręgowanego unieruchomionej w agarozie i umieszczonej na szalce Petriego zawierającej roztwór znieczulający.
Umieść go pod dwufotonowym mikroskopem laserowym, który wykorzystuje dwa fotony do szczegółowego obrazowania.
Skoncentruj się na górnej i dolnej warstwie mózgu, aby wyznaczyć granice obrazowania.
Rejestruj obrazy na różnych głębokościach, aby obserwować neurony przed leczeniem laserowym.
Dostosuj ostrość do obszaru zainteresowania i dostosuj rozmiar ramki, aby zawęzić ostrość na neuronach.
Wybierz i naświetlaj neurony za pomocą lasera dwufotonowego.
Laser indukuje miejscowe ciepło, co powoduje śmierć neuronów przy minimalnym uszkodzeniu otaczającej tkanki. Uchwyć obraz.
Porównaj obrazy przed i po zabiegu, aby ocenić zmiany fluorescencji.
Ponownie skoncentruj neurony na głębszych płaszczyznach i powtórz napromienianie, aby leczyć wszystkie neurony w obszarze zainteresowania.
Ponownie przechwyć obraz i porównaj go z obrazem przed zabiegiem. Utrata fluorescencji po leczeniu laserowym potwierdza udaną ablację neuronów.
Umieść larwę zanurzoną w agarozie pod 2-fotonowym laserowym mikroskopem skaningowym i uruchom system mikroskopowy. Otwór
Wyświetl pełny transkrypt i uzyskaj dostęp do tysięcy filmów naukowych